ICS 11. 220 B 41 GB 中华人民共和国国家标准 GB/T 27641—2011 马螨病诊断技术 Diagnostic techniques for horse mange 2011-12-30发布 2012-04-01实施 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发布 中国国家标准化管理委员会 GB/T 27641—2011 前言 本标准按照GB/T1.1—2009的规则起草。 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国动物防疫标准化技术委员会（SAC/TC181)归口。 本标准起草单位：中华人民共和国山东出入境检验检疫局、中国动物卫生与流行病学中心。 本标准主要起草人：梁成珠、朱来华、郑小龙、肖西志、邓明俊、岳志芹、毕道荣、梁君妮、徐彪。 I GB/T27641—2011 马螨病诊断技术 1范围 本标准规定了马螨病临床检查、病原样品采集与鉴定等诊断技术要求 本标准适用于马螨病的检疫和诊断。 2临床检查 2.1临床特征 马患本病时，先由头、颈、体侧开始，随后蔓延至肩、背、全身，足螨则主要寄生于四肢的下半部。主 要表现为皮肤发痒，骚动不安，舔、咬、踢瘙痒部，常倚物摩擦；被毛凌乱，拔开患部被毛，患部皮肤出现结 节、水泡，破溃后形成痴皮，被毛脱落，皮肤肥厚，皱褶，病马日渐消瘦。在诊断中，可观察动物是否有用 嘴轻咬或摩擦患处皮肤的表现。在拥挤的围栏中强迫动物运动，使机体发热，促进皮肤吸收螨虫的抗原 或刺激物（分泌物），激发临床症状。 2.2初步判定 2.2.1根据临床症状如剧痒、皮肤增厚、有痴皮、脱毛和消瘦等特征可做出初步判定。 2. 2. 2 当发现可疑马匹时，需继续观察或采取病料送实验室进一步病原学检查。 3病原样品采集与鉴定 3.1设备、器械与试剂 3.1.1设备、器械 显微镜（100×）、恒温箱（4℃～60℃）、离心机（离心速度3000r/min）、酒精灯、凸刃小刀、棉拭子、 骨科刮勺、自封袋、平血、试管、载玻片等。 3.1.2试剂 甘油或液体石蜡、10%氢氧化钟（钠）溶液，60%硫代硫酸钠溶液等。 3.2显微镜检查 3.2.1病料的采集 3.2.1.1保定马匹，将患部与健康部交界处被毛剪掉，用通过火焰灭菌的凸刃小刀倾斜45°刮取裸露 部皮屑直到皮肤微出血为止。收集刮下的病料进行实验室检查。 3.2.1.2用适当大小的棉拭子插入外耳道直到遇到阻力，然后轻轻地旋转并退出。插入外耳道要轻柔 细心，注意马匹的反应。或用骨科刮勺刮取马耳内廓耳垢 3.2.1.3将皮屑和耳垢迅速转移到自封袋或平Ⅲ内密封后送往实验室待检 3.2.1.4采集病料前，滴一滴甘油或液体石蜡在皮肤或器具上有助于螨虫的收集。 1 GB/T 27641—2011 3. 2. 2 检查方法 3.2.2.1直接检查法 取适量病料，37℃恒温箱中作用15min～30min，直接放在平皿上进行镜检。 3.2.2.2温水检查法 将病料浸入40℃～45℃的水中，置恒温箱内，在温热水的作用下，螨虫由皮屑或耳垢内爬出，集成 团而沉人水底，1h～2h后，将浸过病料的液体倒出，将沉渣倾人平皿中镜检。 3.2.2.3沉淀法 将采集的病料置于试管中，加入10%氢氧化钾（钠）溶液，在酒精灯上煮数分钟（或浸泡2h），然后 2000r/min离心沉淀5min，弃上清液，吸取沉淀物，放在载玻片上，进行镜检。 3.2.2.4漂浮法 将采集的病料置于试管中，加人10%氢氧化钾（钠）溶液，煮沸数分钟（或浸泡2h），然后2000r/min 离心沉淀5min，弃上清液，取沉淀物，用蒸馏水将其中的氢氧化钟（钠）浸洗干净，在沉淀物中加入60% 硫代硫酸钠溶液使液体满于管口，但不溢出。静置5min～10min，螨即浮集于液面，可用载玻片直接 取镜检。 3.3结果判定 在显微镜下检查，发现有螨虫体（卵）为阳性结果，未发现螨虫体（卵）为阴性结果（参考附录A和 附录B)。四种检查方法只要一种方法鉴定为阳性，则判定为阳性结果。 N GB/T 27641—2011 附录A （资料性附录） 螨虫的形态示意图 Surcoplesscabieiequi Itch mites 图A.1Sarcopticmangemite 疥螨 图 A. 2 Female scabies mite with egg 雌性疥螨和虫卵