ICS65.020 B15 团 体 标 准 T/JAASS9-2020 水果、蔬菜中吡虫啉农药残留 免疫亲和柱净化高效液相色谱检测技术 DeterminationofImidaclopridbyHighperformanceliquidchromatography withimmunoaffinitycolumnclean-up 2020－10－12发布 2020－10－12实施 江苏省农学会发布 全国团体标准信息平台 T/JAASS9-2020 目次 前言.......................................................................................................................................................................Ⅲ 1范围...................................................................................................................................................................1 2规范性引用文件...............................................................................................................................................1 3术语和定义.......................................................................................................................................................1 4原理...................................................................................................................................................................1 5试剂与材料.......................................................................................................................................................1 6仪器与设备.......................................................................................................................................................1 7试样制备...........................................................................................................................................................2 8测定..................................................................................................................................................................2 9结果判定与表述...............................................................................................................................................3 10检测限和重复性..............................................................................................................................................3 全国团体标准信息平台 III前  言 本文件按照GB/T1.1-2020给出的规则起草。 本文件由江苏省农业科学院提出。 本文件由江苏省农学会归口。 本文件起草单位：江苏省农业科学院、南京农业大学、浙江大学、华南农业大学、广东达元绿洲食 品安全科技股份有限公司。 本文件主要起草人：刘凤权、王利民、华修德、王鸣华、张存政、郭逸蓉、徐振林、石松、孙远明。 全国团体标准信息平台 T/JAASS9-2020 1水果、蔬菜中吡虫啉农药残留 免疫亲和柱净化—高效液相色谱检测技术 1范围 本文件规定了吡虫啉农药残留的免疫亲和层析净化—高效液相色谱检测技术的原理、试剂与材料、 仪器与设备、试样制备、测定、结果计算与表述和重复性。 本文件适用于蔬菜、水果中吡虫啉农药残留的测定。 2规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件， 仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本 文件。 GB2763食品安全国家标准食品中农药最大残留限量 GB/T6682分析实验室用水规格和实验方法 3术语和定义 本文件无术语和定义。 4原理 试样经过甲醇-水提取后，提取液经过滤、稀释后，滤液经过含有吡虫啉特异性抗体的免疫亲和层 析柱层析净化，经高效液相色谱仪分离、检测后，测定试样中吡虫啉的含量。 5试剂与材料 5.1除另有规定外，所有试剂均为分析纯；实验室用水符合GB/T6682中规定的二级水，标准溶液和 流动相用水为一级水。 5.2甲醇色谱纯 5.3苯色谱纯 5.4乙腈色谱纯 6仪器与设备 全国团体标准信息平台 T/JAASS9-2020 26.1吡虫啉免疫亲和柱，柱容量≥300ng。 6.2滤纸9cm双圈定性滤纸 6.3容量瓶20mL容量瓶 6.4高效液相色谱仪 7试样制备 7.1提取 7.1.1取试样可食部分，切碎后，称取20g。 7.1.2加入10mL乙腈（5.4）-水（70:30）溶液涡旋5min，静置30min。 7.1.3随后将样品溶液在滤纸（6.2）上进行固液分离。 7.1.4滤液转移至20mL容量瓶（6.3）并定容至20mL（样品处理液冲洗滤纸中的样品）。 7.1.5样品滤液由稀释液进行5倍稀释，待检测用。 7.2净化 7.2.1将免疫亲和柱（6.1）连接于10.0mL玻璃定量管下。 7.2.2准确移取10.0mL样品提取液注入玻璃定量管中。 7.2.3将空气压力泵与玻璃定量管连接，调节压力使溶液以不超过2mL/min流速缓慢通过免疫亲和柱。 7.2.4待溶液全部流出后，以10.0mL纯水清洗柱子2次，弃去全部流出液。 7.2.5准确加入1.0mL甲醇洗脱，流速不超过1mL/min，收集全部洗脱液于玻璃试管中，加纯水定容 为2.0mL，供色谱检测用。 8测定 8.1色谱条件 色谱柱：SB-C18柱、4.6×250mm 流动相：甲醇+水（15:85）溶液 流速：1.0mL/min 检测波长：紫外波长270nm 柱温：室温 进样量：20μL 8.2色谱测定 全国团体标准信息平台 T/JAASS9-2020 3分别取相同体积样液和标准工作溶液注入高效液相色谱仪，在上述色谱条件下测定试样的响应值 （峰高或峰面积）。经过与吡虫啉标准溶液谱图比较响应值得到试样中吡虫啉的浓度。 9结果计算与表述 试样中吡虫啉含量以质量分数X计，单位为毫克每千克（mg/kg），按式（1）计算： （1） 式中： Pi：试样溶液中吡虫啉组分的峰面积值； Cs：吡虫啉标准溶液浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）； Vs：标准溶液的检测体积（mL）； Ps：吡虫啉标准溶液面积平均值（系列浓度）； m：试样质量，单位为克（g）。 测定结果用平行测定的算术平均值表示，计算结果表示到小数点后一位。 10检测限和重复性 10.1检测限：蔬菜、水果中吡虫啉残留量的检测限为0.2mg/kg，符合GB2763要求。 10.2重复性：在重复实验条件下，两次独立测试结果的绝对差值不大于其算术平均值的15%。 全国团体标准信息平台 T/JAASS9-2020 江苏省农学会团体标准 水果、蔬菜中吡虫啉农药残留 免疫亲和柱净化高效液相色谱检测技术 版权专有不得翻印 全国团体标准信息平台