(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210630164.7 (22)申请日 2022.06.06 (66)本国优先权数据 202110807437.6 2021.07.16 CN (71)申请人 南京吉盛 澳玛生物医药有限公司 地址 210000 江苏省南京市江北新区新锦 湖路3-1号中丹生态 生命科学产业园E 座3楼 (72)发明人 康平　 (74)专利代理 机构 南京众联专利代理有限公司 32206 专利代理师 王荷英 (51)Int.Cl. C07K 16/28(2006.01) A61K 39/395(2006.01)A61P 35/00(2006.01) G01N 33/574(2006.01) G01N 33/68(2006.01) (54)发明名称 PD-1抗体及其用途 (57)摘要 本申请涉及一种PD ‑1抗体及其用途， 所述 PD‑1抗体以约5E ‑07M或以下的KD值与人PD ‑1蛋 白特异性结合， 并 能够阻断PD ‑1与PD‑L1的结合； 本申请还涉及所述抗体中Fc区的改造； 本申请还 提供了包含所述PD ‑1抗体的免疫 缀合物、 制备所 述PD‑1抗体的方法以及P D‑1抗体的用途。 权利要求书6页 说明书38页 序列表22页 附图2页 CN 115521379 A 2022.12.27 CN 115521379 A 1.分离的抗原结合蛋白， 其具有下述 性质中的一种或多种： a)在Biacore检测中， 以约5 E‑07M或以下的KD值与人PD‑1蛋白特异性结合； b)能够阻断P D‑1与PD‑L1的结合。 2.根据权利要求1所述的分离的抗原结合蛋白， 其包含HCDR3， 所述HCDR3包含SEQ  ID  NO:53所示的氨基酸序列。 3.根据权利要求2所述的分离的抗原结合蛋白， 其中所述HCDR3包含SEQ  ID NO:9和SEQ   ID NO:10中任一项所示的氨基酸序列。 4.根据权利 要求1‑3中任一项所述的分离的抗原结合 蛋白， 其包含HCDR2， 所述HCDR2包 含SEQ ID NO:6所示的氨基酸序列。 5.根据权利 要求1‑4中任一项所述的分离的抗原结合 蛋白， 其包含HCDR1， 所述HCDR1包 含SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列。 6.根据权利要求1 ‑5中任一项所述的分离 的抗原结合蛋白， 其包含SEQ  ID NO:54所示 的重链可变区VH的H CDR1、 HCDR2和HCDR3。 7.根据权利要求1 ‑6中任一项所述的分离的抗原结合蛋白， 其包含SEQ  ID NO:29至SEQ   ID NO:31中任一项所示的重链可变区VH的H CDR1、 HCDR2和HCDR3。 8.根据权利要求1 ‑7中任一项所述的分离的抗原结合蛋白， 其包括重链可变区VH， 所述 VH包含所述HCDR1、 HCDR2和HCDR3， 所述HCDR3包含SEQ  ID NO:53所示的氨基酸序列； 所述 HCDR2包含SEQ  ID NO:6所示的氨 基酸序列； 以及所述HCDR1包含SEQ  ID NO:3所示的氨基酸 序列。 9.根据权利要求8所述的分离的抗原结合蛋白， 其中所述HCDR1、 HCDR2和HCDR3包含选 自下述任意 一组的氨基酸序列： a)HCDR1： SEQ ID NO:3， HCDR2： SEQ ID NO:6和HCDR3： SEQ ID NO:9； 和 b)HCDR1： SEQ ID NO:3， HCDR2： SEQ ID NO:6和HCDR3： SEQ ID NO:10。 10.根据权利要求1 ‑9中任一项所述的分离的抗原结合蛋白， 其包含H ‑FR1， 所述H ‑FR1 的C末端与所述HCDR1的N末端直接或间接地相连， 且所述H ‑FR1包含SEQ  ID NO:49所示的氨 基酸序列。 11.根据权利要求10所述的分离 的抗原结合蛋白， 其中所述H ‑FR1包含SEQ  ID NO:1和 SEQ ID NO:2中任一项所示的氨基酸序列。 12.根据权利 要求1‑11中任一项所述的分离的抗原结合 蛋白， 其包含H ‑FR2， 所述H ‑FR2 位于所述H CDR1与所述H CDR2之间， 且所述H ‑FR2包含SEQ ID NO:50所示的氨基酸序列。 13.根据权利要求12所述的分离 的抗原结合蛋白， 其中所述H ‑FR2包含SEQ  ID NO:4和 SEQ ID NO:5中任一项所示的氨基酸序列。 14.根据权利 要求1‑13中任一项所述的分离的抗原结合 蛋白， 其包含H ‑FR3， 所述H ‑FR3 位于所述H CDR2与所述H CDR3之间， 且所述H ‑FR3包含SEQ ID NO:51所示的氨基酸序列。 15.根据权利要求14所述的分离 的抗原结合蛋白， 其中所述H ‑FR3包含SEQ  ID NO:7和 SEQ ID NO:8中任一项所示的氨基酸序列。 16.根据权利 要求1‑15中任一项所述的分离的抗原结合 蛋白， 其包含H ‑FR4， 所述H ‑FR4 的N末端与所述HCDR3的C末端直接或间接地相连， 且所述H ‑FR4包含SEQ  ID NO:52所示的氨 基酸序列。权　利　要　求　书 1/6 页 2 CN 115521379 A 217.根据权利要求16所述的分离的抗原结合蛋白， 其 中所述H‑FR4包含SEQ  ID NO:11和 SEQ ID NO:12中任一项所示的氨基酸序列。 18.根据权利要求1 ‑17中任一项所述的分离的抗原结合蛋白， 其包含H ‑FR1， H‑FR2， H‑ FR3和H‑FR4， 所述H ‑FR1包含SEQ  ID NO:49所示的氨基酸序列； 所述H ‑FR2包含SEQ  ID NO: 50所示的氨基酸序列； 所述H ‑FR3包含SEQ  ID NO:51所示的氨基酸序列； 以及所述H ‑FR4包 含SEQ ID NO:52所示的氨基酸序列。 19.根据权利要求18所述的分离 的抗原结合蛋白， 其中所述H ‑FR1包含SEQ  ID NO:1和 SEQ ID NO:2中任一项所示的氨 基酸序列； 所述H ‑FR2包含SEQ  ID NO:4和SEQ  ID NO:5中任 一项所示的氨基酸序列； 所述H ‑FR3包含SEQ  ID NO:7和SEQ  ID NO:8中任一项所示的氨基 酸序列； 以及所述H ‑FR4包含SEQ ID NO:11和SEQ ID NO:12中任一项所示的氨基酸序列。 20.根据权利要求18 ‑19中任一项所述的分离的抗原结合蛋白， 其 中所述H‑FR1、 H‑FR2、 H‑FR3和H‑FR4包含选自下述任意 一组的氨基酸序列： a)H‑FR1： SEQ ID NO:1， H‑FR2： SEQ ID NO:4， H‑FR3： SEQ ID NO:7和H‑FR4： SEQ ID NO: 11； 和 b)H‑FR1： SEQ ID NO:2， H‑FR2： SEQ ID NO:5， H‑FR3： SEQ ID NO:8和H‑FR4： SEQ ID NO: 12。 21.根据权利要求1 ‑20中任一项所述的分离的抗原结合蛋白， 其包含重链可变区VH， 所 述VH包含SEQ ID NO:54所示的氨基酸序列。 22.根据权利要求21所述的分离的抗原结合蛋白， 其 中所述VH包含SEQ  ID NO:29至SEQ   ID NO:31中任一项所示的氨基酸序列。 23.根据权利 要求1‑22中任一项所述的分离的抗原结合 蛋白， 其包含LCDR3， 所述LCDR3 包含SEQ ID NO:59所示的氨基酸序列。 24.根据权利要求23所述的分离的抗原结合蛋白， 其 中所述LCDR3包含SEQ  ID NO:21至 SEQ ID NO:26中任一项所示的氨基酸序列。 25.根据权利 要求1‑24中任一项所述的分离的抗原结合 蛋白， 其包含LCDR2， 所述LCDR2 包含SEQ ID NO:18所示的氨基酸序列。 26.根据权利 要求1‑25中任一项所述的分离的抗原结合 蛋白， 其包含LCDR1， 所述LCDR1 包含SEQ ID NO:15所示的氨基酸序列。 27.根据权利要求1 ‑26中任一项所述的分离 的抗原结合蛋白， 其包含SEQ  ID NO:60所 示的轻链可变区VL的LCDR 1、 LCDR2和LCDR3 。 28.根据权利要求1 ‑27中任一项所述的分离 的抗原结合蛋白， 其包含SEQ  ID NO:32至 SEQ ID NO:38中任一项所示的轻链可变区VL的LCDR 1、 LCDR2和LCDR3 。 29.根据权利要求1 ‑28中任一项所述的分离的抗原结合蛋白， 其包含轻链可变区VL， 所 述VL包含所述LCDR1、 LCDR2和LCDR3， 所述LCDR3包含SEQ  ID NO:59所示的氨 基酸序列； 所述 LCDR2包含SEQ  ID NO:18所示的氨基酸序列； 以及所述LCDR1包含SEQ  ID NO:15所示的氨 基 酸序列。 30.根据权利要求28 ‑29中任一项所述的分离 的抗原结合蛋白， 其中所述LCDR1、 LCDR2 和LCDR3包 含选自下述任意 一组的氨基酸序列： a)LCDR1： SEQ ID NO:15， LCDR2： SEQ  ID NO:18和LCDR3： SEQ  ID NO:21；权　利　要　求　书 2/6 页 3 CN 115521