(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210636788.X (22)申请日 2022.06.07 (71)申请人 南京皓羽生物科技有限公司 地址 210000 江苏省南京市栖霞区栖霞街 道广月路3 3-18号 (72)发明人 史皓羽　刘燕武　 (51)Int.Cl. C07K 16/28(2006.01) A61K 39/395(2006.01) A61K 39/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种DC瘤苗及其制备的药物组合物 (57)摘要 本发明涉及一种DC瘤苗及其制备的药物组 合物。 本发明特异性的制备针对胃癌的DC瘤苗， 该瘤苗具有较好的刺激免疫反应， 与CLDN18.2单 克隆抗体联合应用或者单独使用均可以有效的 行使杀伤肿瘤细胞的功能， 具有较好的应用价 值。 权利要求书1页 说明书7页 序列表3页 附图2页 CN 114790243 A 2022.07.26 CN 114790243 A 1.特异性针对CLDN18.2的单克隆抗体CLDN18.2 ‑5， 其特征在于所述抗体的轻链可变区 的氨基酸序列如SEQ  ID NO.4所示： DLVMTQTAPSVPVTPGESVSISCRSTAWCSAKLTGPLLYWFLQRPGQSPQLLIYPWANLASGVPDRFSGSGSG TAFTLRISRVEAEDVGVY YCCQYEHMTLNFGSGTKLEIK 重链可变区的氨基酸序列如SEQ  ID NO.5所示： VKPGGSLKLSCAASKSDFDIMHMSWVRQTPDKRLEWVAIRSWCQLWAYYPDSVKGRFTIS RDQDKQTLYLQM SSLKSEDTAM YYCIWMGKYCSPQMWGQGT TVTVS。 2.如权利要求1所述的单 克隆抗体在制备用于治疗胃癌的药物组合物中的用途。 3.特异性针对CLDN18.2的单克 隆抗体CLDN18.2 ‑5以及DC瘤苗在制备用于治疗SNU601 细胞导致的胃癌的药物组合物中的用途； 其中， 所述所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列 如SEQ ID NO.4所示： DLVMTQTAPSVPVTPGESVSISCRSTAWCSAKLTGPLLYWFLQRPGQSPQLLIYPWANLASGVPDRFSGSGSG TAFTLRISRVEAEDVGVY YCCQYEHMTLNFGSGTKLEIK 重链可变区的氨基酸序列如SEQ  ID NO.5所示： VKPGGSLKLSCAASKSDFDIMHMSWVRQTPDKRLEWVAIRSWCQLWAYYPDSVKGRFTIS RDQDKQTLYLQM SSLKSEDTAM YYCIWMGKYCSPQMWGQGT TVTVS； 所述DC瘤苗是将DC细 胞导入胃癌SNU601细 胞的mRNA制备的， 所述的DC细 胞是从外周血 中分离制备并经 过诱导成熟的DC细胞。 4.如权利要求2或3所述用途， 其特征在于所述的药物组合物中还还有药学上可接受的 载体。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114790243 A 2一种DC瘤苗及其制备的药物组合物 技术领域 [0001]本发明涉及生物领域， 更 具体的， 涉及一种DC瘤苗及其制备的药物组合物。 背景技术 [0002]CLDJV18.2基因位于人染色体3q22位点。 CLDN18.2由261个氨基酸组成， 为四次跨 膜结构， 相对分子质量277不大， 其氨基端和羧基端均位于细胞膜内侧。 CLDN18.2有2个胞外 环结构域， 胞外环1是由53个氨基酸构成的4个 反向折叠的3片层结构， 其中β 3与β 4之间存在 2个高度保守的半胱氨酸， 它们之间形成的二硫键有助于分子结构的稳定； 胞外环2由31个 氨基酸组成， 位于跨膜区3和跨膜区4之间。 CLDN18.2限制性表达于分化成熟的胃黏膜上皮 细胞以及多种肿瘤 细胞表面， 在胃干细胞区及其 他正常组织中不表达 。 [0003]CLDN18.2的异常表达与多种癌症的发生发展密切相关。 有研究表明， CLDN18.2的 表达升高与胆管肿 瘤的形成有关， CLDN18.2参与了人体内胆管腺癌细胞的发生、 增殖和 侵 袭过程， 在胆管腺癌侵袭前沿细胞表面过表达。 此外， 在非小细胞肺癌的恶性转化中也有 CLDN18.2的异常活化。 然而， 在Oshima等的研究中， 胃癌侵袭的前沿组织中CLDN1&2的表达 量降低， 揭示了胃癌细胞的增殖和侵袭可能与CLDN18.2的表达下调相关。 在病理状态下， Claudin18.2在多种肿瘤中有的表达显著上调， 包括80％的胃肠道腺瘤、 60％的胰腺肿瘤。 此外， CLDN 18.2活化还 可见于食 管癌、 卵巢癌和肺腺癌中， 因此是具有潜力治疗癌症的热门 靶点。 [0004]IMAB362是德国Ganymed公司开 发的耙向CLDN18.2的人鼠嵌合单抗， 利用重组抗体 表达技术在中 国仓鼠卵巢细胞中生产。 IMAB362可特异性识别细胞表 面的CLDM8.2而不结合 CLDN18.1， 介导抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用(antibody ‑dependentcell ‑ mediatedcytotoxicity， ADCC)和补体依赖的细胞毒作用(complement ‑ dependentcytotoxicity， CDC)， 且具有抑制细胞增殖和介导细胞凋亡等生物学功能。 在胰 腺癌模型中的研 究发现， MAB362能够特异性结合胰腺癌细胞并介导ADCC和CDC使细胞裂解 凋亡， 裂解能力与细胞表 面CLDN18.2表达量呈正相关。 而且， 化疗 药物吉西他滨 可上调体外 培养的人胰腺癌细胞中CLDN18.2的表达， 增强IMAB362诱导的ADCC活性。 在来自人胰腺癌细 胞系(包括吉西他滨耐药系)的小鼠异种移 植瘤中， IMAB362能减缓肿瘤生长， 延 长小鼠生存 时间， 并降低转移瘤的发展潜能。 [0005]树突状细胞(DC)在启动免疫反应中发挥关键作用,是机体内最重要、 功能最强的 专职抗原递呈细胞,因此是抗肿瘤免疫的最好佐剂 。 近年来许多研究证实,将不同形式肿瘤 抗原负载的DC制成疫苗,可以在体内外诱导特异杀伤性T细胞(CTL)的生成,激发人体有效 的特异性抗肿瘤免疫功能,并在恶性肿瘤尝试性治疗中取得了令人振奋的疗效。 目前,D C介 导的瘤苗主要有以下几种 ①抗原肽刺激的DC； ②肿瘤提取物刺激的DC； ③肿瘤抗原基因转 染的DC；④肿瘤细胞与D C的融合细胞； ⑤抗原肽刺激D C的亚细胞结构疫苗。 肿瘤抗原的各种 负载形式均可以有效负载DC 。 [0006]肿瘤模型的研究也证明肿瘤抗原基因转导的DC疫苗对已形成的肿瘤有治疗作用。说　明　书 1/7 页 3 CN 114790243 A 3