(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202210638618.5 (22)申请日 2022.06.08 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 114716554 A (43)申请公布日 2022.07.08 (73)专利权人 尚健单抗 （北京） 生物技 术有限公 司 地址 100023 北京市大兴区经济技 术开发 区科创六街88号院6号楼4单元501-1 室 专利权人 杭州尚健 生物技术有限公司 (72)发明人 缪仕伟　陶俊　崔航　丁晓然　 谈彬　吕明　 (74)专利代理 机构 北京预立 生科知识产权代理 有限公司 1 1736 专利代理师 高倩倩 (51)Int.Cl. C07K 16/28(2006.01) C07K 16/46(2006.01) C07K 19/00(2006.01) C12N 15/13(2006.01)C12P 21/02(2006.01) A61K 47/68(2017.01) A61K 39/00(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/02(2006.01) A61P 37/02(2006.01) A61P 7/04(2006.01) A61P 7/02(2006.01) G01N 33/68(2006.01) (56)对比文件 CN 112672760 A,2021.04.16 CN 110366563 A,2019.10.2 2 WO 2021183839 A 2,2021.09.16 CN 113402602 A,2021.09.17 Yasuaki Anami等.LILRB4-targeti ng Antibody-Drug Co njugates for the Treatment of Acute Myel oid Leukemia. 《Mo l Cancer Ther》 .2020,第19卷(第1 1期),第23 30- 2339页. 审查员 王航 (54)发明名称 抗原结合蛋白及其应用 (57)摘要 本发明公开了一种抗原结合蛋白及其应用， 具体的， 所述的抗原结合蛋白包含第一可变区和 第二可变区， 其中， 所述的第一可变区是重链可 变区， 所述的重链可变区的CDR1、 CDR2、 CDR3的氨 基酸序列如SEQ  ID NO.3‑5所示， 所述的第二可 变区是轻链可变区， 所述的轻链可变区的CDR1、 CDR2、 CDR3的氨基酸序列如SEQ  ID NO.6‑8所示。 权利要求书1页 说明书8页 序列表9页 附图2页 CN 114716554 B 2022.08.26 CN 114716554 B 1.一种能与LILRB4特异性结合的抗原结合蛋白， 所述的抗原结合蛋白包括抗体或其抗 原结合片段， 其特征在于， 所述的抗原结合蛋白包含第一可变区和第二可变区， 其中， 所述 的第一可变区是重链可变区， 所述的重链可变区的CDR1、 CDR2、 CDR3的氨基酸序列如SEQ  ID  NO.3‑5所示， 所述的第二可变 区是轻链可变 区， 所述的轻链可变 区的CDR1、 CDR2、 CDR3的氨 基酸序列如SEQ  ID NO.6‑8所示。 2.根据权利要求1所述的抗原结合蛋白， 其特征在于， 所述的重链可变区的氨基酸序列 如SEQ ID NO.1所示， 所述的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ  ID NO.2所示。 3.编码权利要求1或2所述的抗原结合蛋白的核酸。 4.一种包 含权利要求3所述的核酸的表达载体。 5.一种宿主细胞， 其特征在于， 所述的宿主细胞包含权利要求3所述的核酸或权利要求 4所述的表达载体。 6.一种制备权利要求1或2所述的抗原结合蛋白的方法， 其特征在于， 所述的方法包括 将权利要求5所述的宿主细胞在适合于表达所述的抗原结合蛋白的条件下培养以及回收所 述的抗原结合蛋白。 7.一种双特异性抗体， 其特征在于， 所述的双特异性抗体包含权利要求1或2所述的抗 原结合蛋白。 8.一种偶联物或缀合物， 其特征在于， 所述的偶联物或缀合物包含权利要求1或2所述 的抗原结合蛋白。 9.一种药物组合物， 其特征在于， 所述的药物组合物包含权利要求1或2所述的抗原结 合蛋白。 10.一种嵌合抗原 受体蛋白， 其特征在于， 所述的嵌合抗原 受体蛋白包含权利要求1或2 所述的抗原结合蛋白。 11.一种检测LILRB4蛋白的工具， 其特征在于， 所述的工具包括权利要求1或2所述的抗 原结合蛋白、 权利要求7 所述的双特异性 抗体或权利要求8所述的偶联物或缀 合物。 12.如下任一项所述的应用： （1） 权利要求1或2所述的抗原结合 蛋白、 权利要求3所述的核酸、 权利 要求4所述的表达 载体、 或权利要求7所述的双特异性抗体或权利要求8所述的偶联物或缀合物在制备检测 LILRB4蛋白的工具中的应用； （2） 权利要求1或2所述的抗原结合 蛋白、 权利要求3所述的核酸、 权利 要求4所述的表达 载体、 权利要求7所述的双特异性抗体、 权利要求8所述的偶联物或缀合物、 权利要求9所述 的药物组合物或权利要求10所述的嵌合抗原受体蛋白在制备治疗与LILRB4信号传导相关 的疾病或病症的药物中的应用， 所述的与LIL RB4信号传导相关的疾病或病症包括恶性血液 疾病、 免疫系统疾病或与L ILRB4信号传导相关的实体瘤。 13.一种非诊断目的的检测LILRB4蛋白的方法， 其特征在于， 所述的方法包括使样品与 权利要求 1或2所述的抗原结合蛋白、 权利要求7所述的双特异 性抗体或权利要求8所述的偶 联物或缀 合物接触。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114716554 B 2抗原结合蛋白及其应用 技术领域 [0001]本发明属于细胞免疫学、 分子生物学 领域， 具体涉及一种抗原结合蛋白及其应用。 背景技术 [0002]抑制性白细胞免疫球蛋白样受体(LILRBs  1‑5)， 主要在髓系细胞表达， 同时在肿 瘤干细胞上也高表达， 并可能直接调控癌症的发生和复发以及肿瘤干细胞的活性。 而肿瘤 微环境中大量的髓系细胞， 通常会介导肿瘤发生免疫逃逸， 促进肿瘤生长和转移。 因此， LILRBs在肿瘤生物学中具有双重协同作用— —作为免疫检查 点分子和肿瘤维持因子 。 [0003]在生理条件下， 白细胞免疫球蛋白样受体B4 （LILRB4） 通过在T细胞和浆细胞等多 种免疫细胞上的表达， 在免疫系统的功能中起着非常重要的作用。 在病理条件 下， LILRB4通 过多种信号通路影响各种疾病的进程， 如肿 瘤和白血病的转化和浸润。 LILRB4的差异表达 存在于多种免疫系统疾病中， 如川崎病、 系统性红斑狼疮 （SLE） 和败血症， 最近的研究表明 LILRB4在精神疾病中也起作用。 鉴于LILRB4在免疫系统中的重要作用及其在 多种疾病中的 差异表达， 使其成为多种疾病潜在的治疗 靶点。 发明内容 [0004]本发明的目的在于提供一种能够靶向LILRB4 的抗原结合蛋白， 为实现该目的， 本 发明采用了如下技 术方案： [0005]本发明第一方面提供了一种能与LILRB4特异性结合的抗原结合蛋白， 所述的抗原 结合蛋白包括抗体或其抗原结合片段， 所述的抗原结合蛋白包含第一可变区和第二可变 区， 其中， 所述的第一可变区是重链可变区(VH)， 所述的重链可变区的CDR1、 CDR2、 CDR3的氨 基酸序列如SEQ  ID NO.3‑5所示， 所述的第二可变区是轻链可变区(VL)， 所述的轻链可变区 的CDR1、 CDR2、 CDR3的氨基酸序列如SEQ  ID NO.6‑8所示。 [0006]在本发明的上下文中， 术语 “抗体”(Ab)是指具有在典型生理条件下与抗原 特异性 结合的能力的免疫球蛋白分子、 免疫球蛋白分子的片段或其任一种的衍生物， 其中半衰期 为显著的时间段， 如至少约30min、 至少约45min、 至少约一小时、 至少约两小时、 至少约四小 时、 至少约八小时、 至少约12小时、 约24小时或更长时间、 约48小时或更长时间、 约三、 四、 五、 六、 七天或更长时间等， 或任何其他相关的功能定义的时间段(如足以诱导、 促进、 增强、 和/或调节与结合抗原的抗体相关的生理反应的时间和/或足以使抗体招募效应子活性的 时间)。 免疫球蛋白分子的重链和轻链的可变区含有与抗原相互作用的结合结构域。 抗体 (Ab)的恒定区可以介导免疫球蛋白与宿 主组织或因子的结合， 所述宿 主组织或因子包括免 疫系统的各种细胞(如效应细胞)和补体系统的组分(如C1q， 即补体激活的经典途径中的第 一组分)。 抗体也可以是双特异性 抗体、 双抗体、 多特异性 抗体或类似分子 。 [0007]在本申请中， 术语 “抗原结合片段 ”通常是指 一个与抗原 结合 （即特异性结合） 的完 整抗体 （即与它们所衍生的完整抗体） 竞争的免疫球蛋白或抗体的多肽片段。 所述抗原结合 片段可以包括但不限于： Fab、 Fab ’、 F(ab’)2和Fv片段， 线性抗体， 单链抗体， 双体抗体， 以及说　明　书 1/8 页 3 CN 114716554 B 3