(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210648322.1 (22)申请日 2022.06.09 (71)申请人 宗金宝 地址 266000 山东省青岛市 市北区人民路4 号青岛市海慈医疗集团B楼三楼检验 科 (72)发明人 宗金宝　常晓天　王彦　王昌媛　 (74)专利代理 机构 郑州欧凯专利代理事务所 (普通合伙) 41166 专利代理师 程书强 (51)Int.Cl. A61K 39/395(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 治疗乳腺癌的药物及PADI4单克隆抗体的应 用 (57)摘要 本发明属于生物医药技术领域， 尤其为一种 治疗乳腺癌的药物及PADI4单克隆抗体的应用， 该治疗乳腺癌的药物在乳腺肿瘤治疗中具有潜 在的应用价值， 该治疗乳 腺癌的药物包括药物有 效量的PADI4单克隆抗体， PADI4单克隆抗体抑制 细胞外PADI4活性可以抑制细胞外瓜氨酸化过 程， 从而显著改变肿瘤细胞的组织微环境， 不利 于肿瘤细胞的生长和转移， PADI4单克隆抗体通 过抑制瓜氨酸 化而发挥治 疗作用。 权利要求书1页 说明书10页 附图13页 CN 114949203 A 2022.08.30 CN 114949203 A 1.一种治疗乳腺癌的药物， 其特征在于： 该治疗乳腺癌的药物包括药物有效量的PADI4 单克隆抗体。 2.根据权利要求1所述的治疗乳腺癌的药物， 其特征在于： 所述PADI4单克隆抗体为人 源PADI4单克隆抗体。 3.根据权利要求2所述的治疗乳腺癌的药物， 其特征在于： 所述人源PADI4单克隆抗体 是以MDA‑MB‑231细胞中的PADI 4作为抗原制备 得到的。 4. PADI4单克隆抗体在制备治疗乳腺癌的药物中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114949203 A 2治疗乳腺癌的药物及PADI4单克隆抗体的应用 技术领域 [0001]本发明属于生物医药技术领域， 具体涉及一种治疗乳腺癌的药物及PADI4单克隆 抗体的应用。 背景技术 [0002]肽基精氨酸脱亚胺酶PADI4 （Pept idyl Arinine Deiminase  4） 能将多种蛋白质中 的精氨酸转化为瓜氨酸， 称为瓜氨酸化， 是一种翻译后修饰过程， PADI4的异常表达及其翻 译后修饰与多种疾病有关， 包括癌症、 类风湿性关节炎、 心血 管疾病和 神经系统疾病。 [0003]我们和其他小组已经证实， PAD I4在各种恶性肿瘤组织和患者血液中都有高表达， 并且其表达水平与肿瘤的病理分类、 肿瘤亚型和临床表现有关， 是胃癌、 食道癌、 结肠癌和 乳腺癌的易感基因， 肿 瘤抗体药物具有低毒高效的特点， 因此， 我们决定开展PADI4单克隆 抗体治疗乳腺癌的研究。 发明内容 [0004]本发明旨在提供一种治疗乳腺癌的药物及PADI4单克隆抗体 的应用， 以通过抑制 PADI4来改善乳腺癌患者病情。 [0005]在我们以往的研究中， 我们发现PADI4在乳腺肿瘤组织中的表达水平远高于癌旁 组织， 患者血液中PADI4的浓度也显著高于健康人和术后患者。 PADI4也是乳 腺癌易感基因， 在乳腺癌发生中起重要作用。 [0006]另外， 多项研究表明， PADI4是肿瘤治疗的靶点， 目前， 已经开展了一些使用PADI4 抑制剂治疗肿瘤的研究。 2011年， 斯拉克等人制备了PADI4小分子化合物抑制剂F ‑酰胺和克 拉米定， 证明这两个化合物能抑制HL ‑60、 MCF‑7和HT‑29肿瘤细胞中PADI4的活性， 最终抑制 肿瘤细胞的生长。 2012年， Wang等人制备了PADI4小分子化合物抑制剂YW3 ‑56， 并在小鼠荷 瘤模型中发现该化合物对肿瘤有抑制作用。 2020年， 该小组在YW3 ‑56化合物 中添加纳米颗 粒， 以增强抑制物对肿 瘤细胞的渗透， 从而改善细胞凋亡和自噬， 并在用HCT ‑116细胞建立 的小鼠荷瘤 模型上显示出显著的治疗效果。 以上研究证明， 抑制PADI4活性是治疗肿瘤的有 效手段。 [0007]我们开展了PADI 4单克隆抗体治疗乳腺癌的研究。 [0008]本研究首先利用人乳腺癌细胞株MDA ‑MB‑231建立裸鼠乳腺癌模型， 然后将制备的 人PADI4单克隆抗体注射到该动物模 型中。 正常情况下， 抗体不能进入肿瘤细胞内部， 然而， 我们和其他团队发现， 肿瘤组织中的各种细胞外基质 （ECM） 成分可以通过瓜氨 酸化修饰， 包 括纤维连接蛋白、 波形蛋白和I型胶原。 此外， 这些瓜氨酸化的细胞外基质成分在刺激肿瘤 细胞的生长和转移方面发挥着重要作用。 因此， PADI4单克隆抗体可能通过抑制ECM成分的 瓜氨酸化而发挥治疗肿瘤的作用。 在本研究中， 我们用PADI4重组蛋白与细胞外基质中最重 要的蛋白 ‑‑纤维连接蛋白进行瓜氨 酸化， 然后用瓜氨 酸化纤维连接蛋白 （Cit ‑FN） 培养MDA ‑ MB‑231细胞， 观 察其对肿瘤细胞的作用， 证明了PADI4可以通过改变肿瘤细胞和组织的组织说　明　书 1/10 页 3 CN 114949203 A 3