(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210643978.4 (22)申请日 2022.06.09 (66)本国优先权数据 202110654827.4 2021.0 6.11 CN (71)申请人 广东菲鹏制药股份有限公司 地址 523808 广东省东莞 市松山湖园区桃 园路1号10 栋301室 (72)发明人 霍永庭　符俊　芦迪　张喆　 路力生　李凡　龚春喜　 (51)Int.Cl. C07K 16/28(2006.01) C12N 15/13(2006.01) A61K 39/395(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 抗PD-1人源化抗体或其抗原结合片段及其 应用 (57)摘要 本发明涉及生物医药技术领域， 具体而言， 涉及抗PD ‑1人源化抗体或其抗原结合片段及其 应用。 该抗体能高效、 特异性结合PD ‑1， 并能有效 阻断PD‑1与PD‑L1、 PD‑L2结合； 因此， 该抗体或其 抗原结合片段、 及其相关的核 酸、 载体、 细胞或药 物组合物能够制备用于治疗PD ‑1介导的疾病或 病症的药物。 权利要求书1页 说明书14页 序列表6页 附图2页 CN 115466328 A 2022.12.13 CN 115466328 A 1.抗PD‑1人源化抗体或其抗原结合片段， 所述抗体包含轻链CDR区和重链CDR区， 重链 CDR区由HCDR1、 HCDR2、 HCDR3组成， 轻链CDR区由LCDR1、 LCDR2、 LCDR3组成， HCDR1、 HCDR2、 HCDR3的氨基酸序列依次如SEQ  ID NO:8～10所示， LCDR1、 LCDR2、 LCD R3的氨基酸序列依次 如SEQ ID NO:11～13所示， 其特征在于， 所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ  ID  NO:3～5任一项所示。 2.根据权利要求1所述抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 所述抗体的轻链可变区的 氨基酸序列如SEQ  ID NO:6～7任一项所示。 3.根据权利要求2所述抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 所述抗体的重链可变区的 氨基酸序列如SEQ  ID NO:3、 轻链可变区的氨基酸序列如SEQ  ID NO:6所示， 或所述抗体的 重链可变 区的氨基酸序列如SEQ  ID NO:4、 轻链可变 区的氨基酸序列如SEQ  ID NO:7所示， 或所述抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ  ID NO:5、 轻链可变区的氨基酸序列如SEQ   ID NO:7所示。 4.根据权利要求1～3任一所述抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 所述抗体含有重 链恒定区和轻链恒定区， 所述重链恒定区为IgG1、 IgG2、 IgG3、 IgG4、 IgA、 IgD、 IgE或IgM中的 任一种或几种； 所述轻链恒定区为κ 链或λ链。 5.根据权利要求1～4任一所述抗体或其抗原结合片段， 其特征在于， 所述抗体为嵌合 抗体或多特异性抗体； 所述抗原结合片段为F(ab ’)2、 Fab、 scFv、 Fv及单域抗体中的任一种 或几种。 6.一种核酸， 其特 征在于， 编码所述 抗PD‑1人源化抗体或其 抗原结合片段； 优选地， 所述核酸包括： 编码所述抗体或其抗原结合片段的重链可变区的第一核酸， 和/或， 编码所述 抗体或其 抗原结合片段的轻链可变区的第二核酸。 7.一种载体， 其特 征在于， 所述载体携带权利要求6所述核酸。 8.一种细胞， 其特征在于， 所述细胞携带权利要求6所述核酸、 含有权利要求7所述载体 或能够表达 权利要求1～5任一所述 抗体或其 抗原结合片段。 9.一种药物组合物， 其特征在于， 所述组合物含有权利要求1～5任一所述抗体或其抗 原结合片段、 权利要求6所述核酸、 权利要求7 所述载体或权利要求8所述细胞。 10.权利要求1～5任一所述抗体或其抗原结合片段、 权利要求6所述核酸、 权利要求7所 述载体、 权利要求8所述细胞或权利要求9所述药物组合物在制备用于治疗PD ‑1介导的疾病 或病症的药物中的用途。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115466328 A 2抗PD‑1人源化抗体或其抗原结 合片段及其应用 技术领域 [0001]本发明属于生物医药技术领域。 更具体地， 涉及抗PD ‑1人源化抗体或其抗原结合 片段及其应用。 背景技术 [0002]程序死亡因子 ‑1(PD1)是CD28家族成员， 在活化的B细胞， T细胞及髓样细胞上表 达。 人PD1由基因Pdcd1编码， 位于2q37.3， 全长9.6kb， 由5个外显子和4个内含子组成， 其上 游包含663bp的启动子。 PD1为55KDa的I型跨膜蛋白， 分子结构由胞外区， 跨膜区及胞内区组 成， 胞外区含有一个免疫球蛋白可变区IgV结构域， 胞内区含有免疫受体酪氨酸抑制基序 (ITIM)和免疫受体酪氨酸转换作用模块(ITSM)。 PD ‑1胞外区氨基酸序列和CTLA ‑4有24％的 同源性， 与CD28有28％的同源性。 在T细胞被激活后， PD ‑1主要通过ITIM将酪氨酸磷脂酶 SHP2集合， 导致下游效应分子去磷酸 化。 [0003]PD‑1有两个配体： PD ‑L1和PD‑L2。 PD‑L1和PD‑L2都是B7同源物， PDL基因位于人染 色体9P24.2 位点， 大小为42kb， 其分子结构均包含一个免疫球蛋白样可变区结构域， 一个恒 定区样结构域， 一个跨膜区和一个短的胞质尾巴。 [0004]PD‑1与PD‑L1和PD‑L2结合后可下调T细胞的活化。 PD ‑L1表达于多种肿瘤细胞表 面， 这些肿瘤细胞包括： 肺癌， 胃癌， 肝癌， 食道癌， 肾癌， 卵巢癌， 宫颈癌， 乳 腺癌， 皮肤癌， 结 肠癌， 膀胱癌， 神经胶质癌， 头颈癌， 口腔鳞状细胞癌。 而且这些癌症周边发现大量表达PD ‑ L1的CD8+T细胞， 临床结果统计显示， PD ‑L1在肿瘤细胞上的高表达水平与癌症患者不良预 后有关。 发明内容 [0005]本发明要解决的技术问题是克服现有抗体结合PD ‑1的亲和力和特异性不高的缺 陷和不足， 提供抗P D‑1人源化抗体或其 抗原结合片段及其应用。 [0006]本发明的目的是提供抗PD ‑1人源化抗体或其抗原结合片段， 所述抗体包含轻链 CDR区和重链CDR区， 重链CDR区由HCDR1、 HCDR2、 HCDR3组成， 轻链CDR区由LCDR1、 LCDR2、 LCDR3组成， HCDR1、 HCDR2、 HCDR3的氨 基酸序列依次如SEQ  ID NO:8～10所示， LCDR1、 LCDR2、 LCDR3的氨基酸序列依次如SEQ  ID NO:11～13所示； 所述抗体的重链可变 区的氨基酸序列 如SEQ ID NO:3～5任一项所示。 [0007]所述抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ  ID NO:6～7任一项所示。 [0008]本发明还涉及所述 抗体或其 抗原结合片段相关的核酸、 载体、 细胞或药物组合物。 [0009]本发明还涉及所述抗体或其抗原结合片段、 及其相关的核酸、 载体、 细胞或药物组 合物在制备用于治疗P D‑1介导的疾病或病症的药物中的用途。 附图说明 [0010]图1是不同浓度的P D‑1‑112‑C2对IL‑2/IFN‑γ分泌的影响结果图。说　明　书 1/14 页 3 CN 115466328 A 3