(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210646330.2 (22)申请日 2022.06.09 (71)申请人 河南中医药大学 地址 450000 河南省郑州市金 水区金水东 路156号 (72)发明人 王斯佳　李圆圆　孙月　王飞燕　 (74)专利代理 机构 郑州豫原知识产权代理事务 所(普通合伙) 41176 专利代理师 王士群 (51)Int.Cl. C07D 498/04(2006.01) C07D 498/10(2006.01) C07D 498/14(2006.01) C07D 519/00(2006.01) A61K 31/553(2006.01)A61P 35/00(2006.01) A61P 35/02(2006.01) A61P 19/08(2006.01) A61P 29/00(2006.01) A61P 37/02(2006.01) A61P 25/00(2006.01) A61P 3/00(2006.01) A61P 11/00(2006.01) A61P 9/00(2006.01) (54)发明名称 具有还原响应性的紫精分子、 多肽-紫精衍 生物、 制备方法及应用 (57)摘要 本发明属于生物医药技术领域， 具体涉及一 种具有还原响应性能的紫精分子、 多肽 ‑紫精衍 生物、 制备方法及应用。 所述紫精分子结构为 CnV2+Mal， 其中n＝1,3,5； V2+表示离子态的紫精 分子， Mal表示马来酰亚胺； 将 多肽分子Pep、 CnV2+ Mal溶于去离子 水中， 溶解并混匀， 常温反应结束 后的溶液置于截流分子量为3500的透析袋中透 析24h以上， 干燥透 析袋内溶液后得到多肽 ‑紫精 衍生物。 本发 明利用多肽的带电性能实现对肿瘤 细胞表面的选择性吸附作用， 同时利用紫精分子 在还原剂作用下的疏水性实现对细胞膜的破坏 作用， 从而导致肿瘤细胞的死亡， 实现抗肿瘤潜 能， 故本发明提供的紫精分子、 多肽 ‑紫精衍生物 在抗菌、 抗肿瘤方面有很好的应用前 景。 权利要求书2页 说明书7页 附图2页 CN 114835728 A 2022.08.02 CN 114835728 A 1.一种具有还原响应性的紫精分子， 其特征在于， 所述紫精分子结构为CnV2+Mal， 其中n ＝1、 3或5； V2+表示离子态的紫精， Mal表示马来 酰亚胺； 在还原剂的作用下， 紫精分子被还原变为疏 水的非离 子态CnVMal。 2.根据权利要求1所述的具有还原响应性的紫精分子的制备方法， 其特征在于， 包括以 下步骤： (1)CnV+的合成： 取4,4’ ‑联吡啶溶于溶剂中， 在惰性气氛下加入卤代烷， 避光反应， 反应结束后干燥， 得 到固体CnV+； 所述溶剂为 二氯甲烷或者无 水乙腈； 所述卤代烷 为碘甲烷时得到 C1V+， 为正溴丙烷时得到 C3V+， 为正溴戊烷时得到 C5V+； (2)Mal‑Br的合成： 将羟乙基马来酰亚胺溶于二氯甲烷溶液， 并加入三乙胺混匀； 将2 ‑溴异丁基酰溴溶于 二氯甲烷； 冰水浴中， 将2 ‑溴异丁基酰溴溶液加入羟乙基马来酰亚胺溶液中， 常温下反应； 反应结束后， 萃取、 浓 缩和干燥， 得到马来 酰亚胺基溴化物Mal ‑Br； (3)CnV2+Mal的合成 将(1)中得到的CnV+溶于无水乙腈溶液中， 并加入(2)中得到的Mal ‑Br， 搅拌至完全溶 解， 75‑85℃下避光反应； 反应结束后， 过滤得到滤饼， 清洗和干燥， 最终得到沉淀CnV2+Mal， n ＝1、 3或5 。 3.根据权利要求2所述的具有还原响应性的紫精分子的制备方法， 其特征在于， 包括以 下任一种情况： ①取4,4’ ‑联吡啶溶于二氯甲烷中， 在惰性气氛下加入碘甲烷， 常温避光反应24 ‑48小 时， 过滤并收集滤饼， 洗涤滤饼， 干燥后得到固体C1V+； 4,4’ ‑联吡啶、 碘甲烷、 溶剂的比例为 200mg： 80 μL： 10ml； ②取4,4’ ‑联吡啶溶于二氯甲烷中， 在惰性气氛下加入正溴丙烷， 常温避光反应24 ‑48 小时， 过滤并收集滤饼， 洗涤滤饼， 干燥后得到固体C3V+； 4,4’ ‑联吡啶、 正溴丙烷、 溶剂的比 例为200mg： 120 μL： 10ml； ③取4,4’ ‑联吡啶溶于二 氯甲烷中， 在惰性气氛下加入正溴戊烷， 70 ‑80℃避光反应24 ‑ 48小时， 蒸干溶剂， 干燥后得到固体C5V+； 4,4’ ‑联吡啶、 正溴丙烷、 溶剂的比例为200mg： 160 μ L： 15ml。 4.包含权利要求1所述的紫精分子的多肽 ‑紫精衍生物。 5.根据权利要求4所述的多肽 ‑紫精衍生物， 其特征在于， 所述多肽 ‑紫精衍生物由多肽 分子Pep一端的巯基与紫精分子一端的羟乙基马来 酰亚胺之间的迈克尔加成发生得到； 所述多肽分子Pep的氨基酸序列为CO OH‑KSELSSV‑KSELKSV‑KSELQAV‑KSELQAV‑C‑NH2； 所述多肽 ‑紫精衍生物的结构为COOH ‑KSELSSV ‑KSELKSV ‑KSELQAV ‑KSELQAV ‑C‑V2+‑ CnH2n+1， 其中n＝1、 3或5 。 6.权利要求5所述的多肽 ‑紫精衍生物的制备 方法， 其特 征在于， 包括以下步骤： 将多肽分子Pep、 CnV2+Mal溶于去离子水中， 溶解并混匀， 常温反应， 反应结束后的溶液 置于截流分子量为3500的透析袋中透析24h以上， 干燥透析袋内溶液后得到多肽 ‑紫精衍生 物。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114835728 A 27.根据权利要求5所述的多肽 ‑紫精衍生物， 其特征在于， 在还原剂的作用下， 所述多 肽‑紫精衍生物由亲 水性的Pep ‑CnV2+变为双亲性的Pep ‑CnV。 8.一种还原性响应方法， 其特征在于， 向权利要求1所述紫精溶液中或者权利要求5所 述多肽‑紫精衍生物溶液中添加强还原剂。 9.根据权利要求8所述的还原性响应方法， 其特征在于， 所述强还原剂为N a2S2O3， 多肽‑ 紫精衍生物与Na2S2O3的质量比为1:9。 10.根据权利要求 4所述的多肽 ‑紫精衍生物在抗菌或者制备抗肿瘤产品方面的应用。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 114835728 A 3