(19)国家知识产权局 (12)发明 专利 (10)授权公告 号 (45)授权公告日 (21)申请 号 202210657427.3 (22)申请日 2022.06.10 (65)同一申请的已公布的文献号 申请公布号 CN 114984322 A (43)申请公布日 2022.09.02 (73)专利权人 四川大学 地址 610000 四川省成 都市一环路南 一段 24号 (72)发明人 黄炜　乔铭薪　赵志河　吴晓悦　 朱舟　刘家伶　张博　 (74)专利代理 机构 北京超凡宏宇专利代理事务 所(特殊普通 合伙) 11463 专利代理师 覃蛟 (51)Int.Cl. A61L 27/40(2006.01) A61L 27/20(2006.01) A61L 27/18(2006.01) A61L 27/22(2006.01) A61L 27/50(2006.01) A61L 27/52(2006.01) A61L 27/54(2006.01) A61K 9/06(2006.01) A61K 47/36(2006.01) A61K 47/10(2006.01) A61K 47/42(2017.01)A61K 31/4045(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/04(2006.01) A61P 19/08(2006.01) B32B 9/00(2006.01) B32B 9/04(2006.01) C08J 3/075(2006.01) C08L 5/08(2006.01) C08L 89/00(2006.01) C08K 5/3417(2006.01) (56)对比文件 CN 103736150 A,2014.04.23 US 201731949 9 A1,2017.1 1.09 CN 104840439 A,2015.08.19 CN 190185 0 A,2007.01.24 CN 112107731 A,2020.12.2 2 CN 111281869 A,2020.0 6.16 CN 1488346 A,20 04.04.14 US 2021106562 A1,2021.04.15 EP 1656939 A1,20 06.05.17 WO 20171495 02 A1,2017.09.08 US 2017128419 A1,2017.0 5.11 CN 114159411 A,2022.03.11 WO 20212 22700 A1,2021.1 1.04 (续) 审查员 许敏 (54)发明名称 一种双层水凝胶材 料、 其制备方法及应用 (57)摘要 本发明公开了一种双层水凝胶材料、 其制备 方法及应用， 涉及生物医药技术领域。 通过甲基 丙烯酰化透明质酸(HAMA)和F127形成内层水凝 胶， 利用甲基丙烯酸化明胶(GelMA)形成包覆于 内层水凝胶上的外层水凝胶， 内外两层水凝胶上 均负载有褪黑素， 在外层水凝胶上高浓度褪黑素 具有抑制肿瘤增殖、 分化及转移的功能， 在内层 水凝胶上低浓度的褪黑素则具有促进干细胞成骨分化的能力。 通过构建MT@GelMA/HA MA/F127双 层水凝胶载药系统， 程序化释放药物， 在术后初 期迅速杀灭肿瘤细胞， 后期缓慢释放褪黑素并为 成骨细胞提供支架促进骨修复， 以达到抑制骨肉 瘤术后复发， 并促进病损区骨修复的目的。 [转续页] 权利要求书2页 说明书8页 附图7页 CN 114984322 B 2022.12.20 CN 114984322 B (56)对比文件 谭芷芬等.褪黑素在 骨肉瘤治 疗中的应用机 制. 《中国比较医学杂志》 .2021,第31卷(第12 期),115-120页. Huang Ji nming等.Melato nin having Therapeutic Bo ne Regenerati ng Capacity i n Biomaterials. 《CUR RENT PHARMAC EUTICAL BIOTECHNOLOGY》 .2021,第23卷(第5期),第707- 718页. Dai Wenli等.3D Bi oprinting of Heterogeneous Co nstructs Providi ng Tissue-Specific Microenviro nment Based o n Host-Guest Modulated Dynamic Hydrogel Bioink for Osteochondral Regenerati on. 《ADVANCED FUNCTIONAL MATERIALS》 .202 2,第32 卷(第23期),文献号2 200710. 刘立峰等.不同浓度褪黑素对人骨肉瘤MG- 63细胞增殖的影响. 《中国医科 大学学报》 .2016, 第45卷(第1 1期),1017-1021页.2/2 页 2[接上页] CN 114984322 B1.一种双层水凝胶材料， 其特征在于， 包括内层水凝胶和包覆于所述内层水凝胶上的 外层水凝胶， 所述内层水凝胶是由甲基丙烯酰化透明质酸和F127混合后光固化形成， 所述 外层水凝胶是由甲基丙烯酸化明胶光固化形成， 在所述内层水凝胶和所述外层水凝胶上均 负载有褪黑素， 所述褪黑素在所述内层水凝胶上的负载量小于在所述外层水凝胶上的负载 量； 制备方法包括： 将甲基丙烯酰化透明质酸、 F127和光引发剂LAP溶液混合得到第一混合 溶液， 将所述第一混合溶液和褪黑素混匀得到内层混合液， 将所述内层混合液在光照条件 下固化成型 得到内层载 药水凝胶； 将甲基丙烯酸化明胶和光引发剂LAP溶液混合得到第二混合溶液， 将所述第二混合溶 液与褪黑素均匀混合得到外层载药水凝胶混合液， 将外层水凝胶混合液均匀包裹固化后的 内层水凝胶后进行光照固化， 以在所述内层水凝胶上 形成所述外层水凝胶； 甲基丙烯酰化透明质酸、 F127和光引发剂LAP溶液的质量体积比为5 ‑10g： 2‑5g:100mL， 光引发剂LAP溶 液的质量分数为0.2 ‑0.3％； 外层甲基丙烯酸化 明胶和光引发剂LAP溶液之间 的质量体积比为5 ‑10g:100mL， 光引发 剂LAP溶液的质量分数为0.2 ‑0.3％； 甲基丙烯酰化透明质酸在 所述第一混合溶液中的质量分数为0.05 ‑0.1g/mL， F127在 所 述第一混合溶液中的质量分数为0.02 ‑0.05g/mL， 每毫升所述第一混合溶液对应褪黑素的 用量为0.23‑2.32mg； 甲基丙烯酸化明胶在所述第二混合溶液中的质量分数为0.05 ‑0.10g/mL， 每毫升所述 第二混合溶 液对应褪黑素的用量 为2.90‑92.91mg。 2.根据权利要求1所述的双层水凝胶材料， 其特征在于， 甲基丙烯酰化透明质酸、 F127 和光引发剂LAP溶液之间的质量体积比为5g:5g:100mL， 光引发剂LAP溶液的质量分数为 0.25％。 3.一种权利要求1 ‑2中任一项所述的双 层水凝胶材 料的制备 方法， 其特 征在于， 包括： 将甲基丙烯酰化透明质酸、 F127和光引发剂LAP溶液混合得到第一混合溶液， 将所述第 一混合溶液和褪黑素混匀得到内层混合液， 将所述内层混合液在光照条件 下固化成型得到 内层载药水凝胶； 将甲基丙烯酸化明胶和光引发剂LAP溶液混合得到第二混合溶液， 将所述第二混合溶 液与褪黑素均匀混合得到外层载药水凝胶混合液， 将所述的外层水凝胶混合液均匀包裹固 化后的内层水凝胶后进行光照固化， 以在所述内层水凝胶上 形成所述外层水凝胶； 甲基丙烯酰化透明质酸、 F127和光引发剂LAP溶液的质量体积比为5 ‑10g： 2‑5g:100mL， 光引发剂LAP溶 液的质量分数为0.2 ‑0.3％； 外层甲基丙烯酸化 明胶和光引发剂LAP溶液之间 的质量体积比为5 ‑10g:100mL， 光引发 剂LAP溶液的质量分数为0.2 ‑0.3％； 甲基丙烯酰化透明质酸在 所述第一混合溶液中的质量分数为0.05 ‑0.1g/mL， F127在 所 述第一混合溶液中的质量分数为0.02 ‑0.05g/mL， 每毫升所述第一混合溶液对应褪黑素的 用量为0.23‑2.32mg； 甲基丙烯酸化明胶在所述第二混合溶液中的质量分数为0.05 ‑0.10g/mL， 每毫升所述 第二混合溶 液对应褪黑素的用量 为2.90‑92.91mg。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 114984322 B 3