(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210684857.4 (22)申请日 2022.06.13 (71)申请人 东南大学 地址 210096 江苏省南京市玄武区新 街口 街道四牌楼 2号 (72)发明人 刘冉　孙明军　汤颖　高志奎　 (74)专利代理 机构 北京同辉知识产权代理事务 所(普通合伙) 11357 专利代理师 王艳秋 (51)Int.Cl. A61K 45/00(2006.01) A61K 31/713(2006.01) A61K 47/46(2006.01) A61K 35/13(2015.01) A61P 35/00(2006.01)C12Q 1/6886(2018.01) C12Q 1/6851(2018.01) C12N 15/11(2006.01) (54)发明名称 抑制hsa_circ_0002557表达 的外泌体在食 管癌的治 疗及药物中的应用 (57)摘要 本发明公开了抑制hsa_circ_0002557表达 的外泌体在食 管癌的治疗及药物中的应用， 所述 hsa_circ_0002557在食管鳞状细胞癌组织及癌 细胞源性外泌体内高表达。 本发 明通过抑制外泌 体负载hsa_cir c_0002557药物， 抑制食管鳞状细 胞癌的侵袭及迁移。 食管癌微环境穿梭hsa_ circ_002557通过重塑成纤维细胞外基质在食管 鳞状细胞癌发挥促癌作用， 其可作为治疗靶点在 抑制癌相关成纤维细胞活化 以阻碍食管鳞状细 胞癌迁移侵袭药物中应用， 为癌相关成 纤维细胞 作为食管癌潜在治 疗靶标指明新方向。 权利要求书1页 说明书13页 序列表2页 附图5页 CN 115040654 A 2022.09.13 CN 115040654 A 1.一种用于治疗食管癌的药物， 包括： hsa_circ_0002557表达抑制剂， 所述的hsa_ circ_0002557序列为SEQ  ID NO.1。 2.根据权利要求1所述的药物， 其特 征在于， 所述抑制剂为siRNA。 3.根据权利要求1所述的药物， 其特 征在于， 还 包括所述抑制剂的递送载体。 4.根据权利要求2所述的药物， 其特征在于， 所述的siRNA序列为SEQ  ID NO.2和SEQ  ID  NO.3。 5.根据权利要求3所述的药物， 其特 征在于， 所述 递送载体为外泌体。 6.一种食管癌筛查试剂盒， 包括检测hsa_circ_0 002557表达量的试剂。 7.根据权利要求6所述的试剂盒， 其特征在于， 所述试剂为检测hsa_circ_0002557表达 量的RT‑qPCR试剂。 8.根据权利要求6所述的试剂盒， 其特征在于， 所述RT ‑qPCR的两条特异性引物序列分 别为SEQ ID NO.4与SEQ  ID NO.5。 9.权利要求1所述的hsa_circ_0002557表达抑制剂在制备用于抑制食管成纤维细 胞活 化为癌相关成纤维细胞 药物中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115040654 A 2抑制hsa_circ_0 002557表达的外泌体在食管癌的 治疗及药物 中的应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物医药领域， 具体涉及抑制hsa_circ_0002557表达的外泌体在食管 癌的治疗及药物中的应用。 背景技术 [0002]食管癌是一种具有高发病率、 高死亡率及高复发率等特征的消化道肿瘤。 根据 2020年国际癌症研究机构数据报告显示， 食 管癌发病率(60万)和死亡率(54万)分居全球癌 症第八位和第六位； 而在中国， 食管癌发病 率(32万)和死亡率(30万)分居我国癌症第六位 和第四位， 其发病率和死亡率已超过全世界二分之一。 食管癌病理类型主要包括鳞状细胞 癌和腺癌， 在南 非、 东非、 东亚等食 管癌高发区， 90％的病理类型为食管鳞状细胞癌。 我国河 南、 河北、 山西、 福建、 江苏等地也均是食管癌高发地带， 已经成为了威胁人们健康的重大公 共卫生问题。 近年来， 医学快速进步虽在食管癌治疗方面虽取得一定改善， 如开放性手术、 微创手术、 放化疗、 免疫治疗和靶向治疗等， 但患者5年生存率仍低于15％。 其预后较差则与 肿瘤特征有关， 如自给自足的生长信号、 抗生长信号不敏感性、 躲避凋亡、 无限的复制能力、 持续血管生 成和组织侵袭转移。 在此基础上， 2011年Hanahan和Weinberg重新审 视和扩展了 这六大特征， 在此基础上增加了基因组的不稳定性、 能量代谢改变、 免疫 杀伤躲避和促进肿 瘤炎症， 将肿瘤微环境(T umor microenviro nment,TM E)也涵盖在内。 [0003]近年来， 越来越多的研究显示包括细胞外基质、 可溶性分子及肿瘤基质细胞等成 分在内的TME是癌细胞生长的 “老巢”， 其中肿瘤基质细胞约50％是由癌相关成纤维细胞 (cancer associated  fibroblasts， CAFs)组成。 CAFs不仅可通过分泌多种细胞因子或代谢 产物抑制免疫细胞功能， 促进肿瘤发展、 侵袭及转移； CAFs还具有塑造肿瘤细胞外基质 、 形 成药物或治疗性免疫细胞渗透屏障以阻止药物与免疫细胞向肿瘤组织的深层渗透， 从而降 低肿瘤治疗效果。 课题组前期发现食管癌细胞源性条件培养基可诱导正常成纤维细胞 (Normal fibroblasts,NFs)活化为CAFs。 而外泌体作为条件培养基的关键成分， 其可以改 造受体组织的微环境， 使其更适于肿瘤细胞的生长。 但目前， 癌细胞源性外泌体如何介导 NFs“叛变”的机制尚未阐明。 因此， 我们迫切需要验证食管癌源外泌体在致NFs活化重塑细 胞外基质促进食管癌进展的作用机制 。 通过对这一过程的阐明， 能够识别肿瘤细胞改变肿 瘤微环境的关键靶点， 明确食管癌高危人群筛检和临床诊疗重点人群的生物标志， 早期发 现恶性程度高的食 管癌患者， 并通过调控CAFs或克服其屏障作用为抑制肿瘤生长及 靶向治 疗提供新的手段。 发明内容 [0004]针对现有技术的不足， 本发明提出了抑制hsa_circ_0002557表达的外泌体在食管 癌的治疗及药物中的应用。 [0005]本发明的目的可以通过以下技 术方案实现：说　明　书 1/13 页 3 CN 115040654 A 3