(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210660177.9 (22)申请日 2022.06.13 (71)申请人 南京融捷康生物科技有限公司 地址 211800 江苏省南京市江北新区探 秘 路73号树屋十六栋07栋 (72)发明人 苏志鹏　王乐飞　孟巾果　张云　 谢维　 (74)专利代理 机构 南京冠誉至恒知识产权代理 有限公司 32426 专利代理师 郭晓敏　薛海霞 (51)Int.Cl. C07K 16/28(2006.01) C12N 15/13(2006.01) A61K 39/395(2006.01) A61P 35/00(2006.01)A61P 35/02(2006.01) A61P 37/02(2006.01) A61P 29/00(2006.01) A61P 19/02(2006.01) A61P 17/06(2006.01) A61P 17/00(2006.01) A61P 37/06(2006.01) A61P 25/00(2006.01) (54)发明名称 一种人源化的抗CD25的单域 抗体及其应用 (57)摘要 本发明属于免疫 学领域， 涉及一种人源化的 抗CD25的单域抗体及其用途。 所述的单域抗体由 重链构成， 重链包括SEQ  ID NO:17所示的重链 CDR1、 SEQ  ID NO:18所示的重链CDR2和SEQ  ID  NO:19所示的重链CDR3， 所述的重链还包括框架 区FR； 所述框架区FR包括FR1、 FR2、 FR3和FR4的氨 基酸序列， 框架区FR序列经过人源化改造。 相对 于现有技术， 本发明的有益效果是： 本发明提供 的抗CD25单域抗体经过了 人源化改造， 保持了其 亲和力和肿瘤细胞增殖阻断效果， 并有效减低了 免疫副反应 。 权利要求书2页 说明书16页 序列表18页 附图6页 CN 115181182 A 2022.10.14 CN 115181182 A 1. 一种人源化的抗CD25的单域抗体， 其特征在于： 所述的人源化的抗CD25的单域抗体 由重链构成， 重链包括SEQ  ID NO:17所示的重链CDR1、 SEQ  ID NO:18所示的重链CDR2和SEQ   ID NO:19所示的重链CDR3， 所述的重链还包括框架区F R； 所述框架区FR包括FR1、 FR2、 FR3和 FR4的氨基酸序列； 框架区FR的氨基酸序列为下述 （1） ‑（16） 的一种： （1） SEQ ID NO:20所示的FR1， SEQ  ID NO:21所示的FR2， SEQ  ID NO:26所示的FR3； SEQ   ID NO:31所示的FR4； （2） SEQ ID NO:20所示的FR1， SEQ  ID NO:21所示的FR2， SEQ  ID NO: 25所示的FR3； SEQ   ID NO:31所示的FR4； （3） SEQ ID NO:20所示的FR1， SEQ  ID NO:21所示的FR2， SEQ  ID NO:24所示的FR3； SEQ   ID NO:31所示的FR4； （4） SEQ ID NO:20所示的FR1， SEQ  ID NO:21所示的FR2， SEQ  ID NO:23所示的FR3； SEQ   ID NO:31所示的FR4； （5） SEQ ID NO:20所示的FR1， SEQ  ID NO:21所示的FR2， SEQ  ID NO:30所示的FR3； SEQ   ID NO:31所示的FR4； （6） SEQ ID NO:20所示的FR1， SEQ  ID NO:21所示的FR2， SEQ  ID NO:29所示的FR3； SEQ   ID NO:31所示的FR4； （7） SEQ ID NO:20所示的FR1， SEQ  ID NO:21所示的FR2， SEQ  ID NO:28所示的FR3； SEQ   ID NO:31所示的FR4； （8） SEQ ID NO:20所示的FR1， SEQ  ID NO:21所示的FR2， SEQ  ID NO:27所示的FR3； SEQ   ID NO:31所示的FR4； （9） SEQ ID NO:20所示的FR1， SEQ  ID NO:22所示的FR2， SEQ  ID NO:26所示的FR3； SEQ   ID NO:31所示的FR4； （10） SEQ ID NO:20所示的FR1， SEQ  ID NO:22所示的FR2， SEQ  ID NO:25所示的FR3； SEQ   ID NO:31所示的FR4； （11） SEQ ID NO:20所示的FR1， SEQ  ID NO:22所示的FR2， SEQ  ID NO:24所示的FR3； SEQ   ID NO:31所示的FR4； （12） SEQ ID NO:20所示的FR1， SEQ  ID NO:22所示的FR2， SEQ  ID NO:23所示的FR3； SEQ   ID NO:31所示的FR4； （13） SEQ ID NO:20所示的FR1， SEQ  ID NO:22所示的FR2， SEQ  ID NO:30所示的FR3； SEQ   ID NO:31所示的FR4； （14） SEQ ID NO:20所示的FR1， SEQ  ID NO:22所示的FR2， SEQ  ID NO:29所示的FR3； SEQ   ID NO:31所示的FR4； （15） SEQ ID NO:20所示的FR1， SEQ  ID NO:22所示的FR2， SEQ  ID NO:28所示的FR3； SEQ   ID NO:31所示的FR4； （16） SEQ ID NO:20所示的FR1， SEQ  ID NO:22所示的FR2， SEQ  ID NO:27所示的FR3； SEQ   ID NO: 31所示的FR4。 2. 一种人源化的抗CD25的单域抗体， 其特征在于： 所述人源化的抗CD25的单域抗体的 氨基酸序列分别如SEQ  ID NO.1‑16中的任意一条所示， 或者所述人源化的抗CD25的单域抗 体与SEQ ID NO.1‑16的氨基酸序列具有至少80％序列同源性。权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115181182 A 23.一种核苷酸分子， 其编码根据权利要求1或2所述的人源化的抗CD25的单域 抗体。 4.一种双特异性抗体， 其特征在于： 所述双特异性抗体包括第一抗原结合部分和第二 抗原结合部分， 第一 抗原结合部分为权利要求1或2所述的人源化的抗CD25的单域 抗体。 5.一种重组蛋白， 其特 征在于： 包 含权利要求1或2所述的人源化的抗CD25的单域 抗体。 6.一种表达载体， 其特征在于： 其包含编码权利要求1或2中所述的人源化的抗  CD25的 单域抗体或者权利要求5所述的重组蛋白的核酸分子 。 7.一种宿主细胞， 其特征在于： 其可以表达出权利要求1或2中所述的人源化的针对 CD25的单域 抗体或权利要求5所述的重组蛋白， 或其包 含权利要求6所述的表达载体。 8.一种检测CD25蛋白水平的试剂盒， 其特征在于： 所述的试剂盒含有权利要求1或2所 述的人源化的抗CD25的单域 抗体。 9.一种药物组合物， 其特征在于： 所述的药物组合物包含选自权利要求1或2所述的人 源化的抗CD25的单域 抗体， 和/或药 学上可接受的载体。 10.权利要求1或2中所述的人源化的抗CD25的单域抗体或权利要求9所述的药物组合 物在制备用于治疗或预防疾病的药物中的用途。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115181182 A 3