(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210660126.6 (22)申请日 2022.06.13 (71)申请人 南京融捷康生物科技有限公司 地址 211800 江苏省南京市江北新区探 秘 路73号树屋十六栋07栋 (72)发明人 苏志鹏　张云　王乐飞　孟巾果　 谢维　 (74)专利代理 机构 南京冠誉至恒知识产权代理 有限公司 32426 专利代理师 郭晓敏　薛海霞 (51)Int.Cl. C07K 16/28(2006.01) C07K 16/46(2006.01) C12N 15/13(2006.01) C12N 15/85(2006.01)C12N 5/10(2006.01) A61K 39/395(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 37/02(2006.01) A61P 37/06(2006.01) (54)发明名称 一种抗CD25的单域 抗体及其应用 (57)摘要 本发明属于免疫学领域， 涉及一种抗CD25的 单域抗体及其应用。 所述的单域抗体由重链构 成， 重链包括SEQ  ID NO:48‑SEQ ID NO:57任意 一条所示的重链CDR1、 SEQ  ID NO:58‑SEQ ID  NO:67任意一条所示的重链CDR2和SEQ  ID NO: 68‑SEQ ID NO:78任意一条所示的重链CDR3。 相 对于现有技术， 本发明的有益效果是： 本发明使 用生物基因工程技术筛选出特异性针对CD25的 单域抗体， 抗体亲和力较好， 并且能阻断特定细 胞释放细胞因子， 通过原核表达及真核表达均具 有良好的结合活性， 具有一定的成药性。 权利要求书2页 说明书16页 序列表22页 附图4页 CN 115181181 A 2022.10.14 CN 115181181 A 1.一种抗CD25的单域抗体， 其特征在于： 所述的单域抗体由重链构成， 所述的重链包括 重链CDR1、 重链CDR2和重链CDR3， 所述的重链CDR1、 重链CDR2和重链CDR3的氨基酸序列为下 述 （1）‑（11） 的一种： （1） SEQ ID NO:48所示的CDR 1， SEQ ID NO:65所示的CDR2， SEQ  ID NO:72所示的CDR3； （2） SEQ ID NO:49所示的CDR 1， SEQ ID NO:67所示的CDR2， SEQ  ID NO:70所示的CDR3； （3） SEQ ID NO:50所示的CDR 1， SEQ ID NO:63所示的CDR2， SEQ  ID NO:68所示的CDR3； （4） SEQ ID NO:51所示的CDR 1， SEQ ID NO:66所示的CDR2， SEQ  ID NO:69所示的CDR3； （5） SEQ ID NO:52所示的CDR 1， SEQ ID NO:58所示的CDR2， SEQ  ID NO:78所示的CDR3； （6） SEQ ID NO:53所示的CDR 1， SEQ ID NO:62所示的CDR2， SEQ  ID NO:76所示的CDR3； （7） SEQ ID NO:54所示的CDR 1， SEQ ID NO:59所示的CDR2， SEQ  ID NO:75所示的CDR3； （8） SEQ ID NO:55所示的CDR 1， SEQ ID NO:64所示的CDR2， SEQ  ID NO:77所示的CDR3； （9） SEQ ID NO:56所示的CDR 1， SEQ ID NO:60所示的CDR2， SEQ  ID NO:71所示的CDR3； （10） SEQ ID NO:56所示的CDR 1， SEQ ID NO:61所示的CDR2， SEQ  ID NO:73所示的CDR3； （11） SEQ ID NO:57所示的CDR 1， SEQ ID NO:60所示的CDR2， SEQ  ID NO:74所示的CDR3 。 2.根据权利要求1所述的一种抗  CD25的单域抗体， 其特征在于： 所述的单域抗体还包 括框架区FR； 所述框架区FR包括FR1、 FR2、 FR3和FR4的氨基酸序列； 框架区FR 的氨基酸序列 分别为： SEQ ID NO:23‑27中的任意一条所示的FR1或FR1的变体， 所述FR1的变体在所述FR1中 包含至多5个氨基酸的替换； SEQ ID NO:28‑33中的任意一条所示的FR2或FR2的变体， 所述FR2的变体在所述FR2中 包含至多5个氨基酸的替换； SEQ ID NO:34‑44中的任意一条所示的FR3或FR3的变体， 所述FR3的变体在所述FR3中 包含至多5个氨基酸的替换； SEQ ID NO:45‑47中的任意一条所示的FR4或FR4的变体， 所述FR4的变体在所述FR4中 包含至多5个氨基酸的替换。 3.一种抗CD25的单域抗体， 其特征在于： 所述单域抗体的氨基酸序列分别如SEQ  ID  NO.1‑11中的任意一条所示， 或者所述单域抗体与SEQ  ID NO.1‑11的氨基酸序列具有至少 80％序列同源性。 4.一种双特异性抗体， 其特征在于： 所述双特异性抗体包括第一抗原结合部分和第二 抗原结合部分， 第一 抗原结合部分为权利要求1至 3中任一项所述的抗CD25的单域 抗体。 5.一种Fc融合抗体或人源化抗体， 其特征在于， 所述Fc融合抗体或人源化抗体包含权 利要求1至 3中任一项所述的抗CD25的单域 抗体。 6.一种编码权利要求1至3 中任一项所述的抗CD25的单域抗体的核苷酸分子， 其特征在 于： 其核苷酸序列分别如SEQ  ID NO： 12‑22中的任意一条所示， 或者与SEQ  ID NO. 12‑22中 的任意一条所示的核苷酸序列具有至少80％序列同源性。 7.一种表达载体， 其特征在于： 其包含编码权利要求1至3中任一项所述的抗  CD25的单 域抗体或者权利要求5所述的Fc融合 抗体或人源化 抗体或者权利要求6所述的核苷酸分子 。 8.一种宿主细胞， 其特征在于： 其可以表达出权利要求1至3中任一项所述的针对CD25 的单域抗体或权利要求5所述的Fc融合抗体或人源化抗体， 或其包含权利要求7所述的表达权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115181181 A 2载体。 9.一种药物组合物或药剂， 其特征在于： 所述的药物组合物或药剂包含选自权利要求1 至3中任一项的抗CD25的单域 抗体， 和/或药 学上可接受的载体。 10.一种特异性靶向  CD25 抗原的靶向药物， 其包括： 权利要求  1‑3任一所述的抗   CD25的单域 抗体， 以及与之连接、 偶联或吸附的功能性药物。 11.权利要求1至3中任一项的抗CD25的单域抗体或权利要求9所述的药物组合物或药 剂在制备用于治疗自身免疫性疾病或肿瘤中的应用， 或者在制备用于预防和/或治疗器官 移植的免疫排斥的药物中的应用。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115181181 A 3