(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210678255.8 (22)申请日 2022.06.13 (71)申请人 右江民族医学院 地址 533000 广西壮 族自治区百色 市城乡 路98号 (72)发明人 刘佳　王玫琦　蓝行　谢欣　李童　 黄锁义　韦忠恒　苏仲剑　周郢嘉　 林家辉　莫国涛　 (74)专利代理 机构 成都天嘉专利事务所(普通 合伙) 5121 1 专利代理师 向丹 (51)Int.Cl. C07C 46/10(2006.01) C07C 50/34(2006.01) C07C 51/42(2006.01)C07C 51/47(2006.01) C07C 51/48(2006.01) C07C 65/03(2006.01) C07D 209/20(2006.01) C07D 311/30(2006.01) C07D 311/40(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61K 31/122(2006.01) A61K 31/192(2006.01) A61K 31/352(2006.01) A61K 31/405(2006.01) (54)发明名称 一种从鸡骨草中分离并提取大黄酚、 木犀草 素、 相思子 碱及原儿茶酸的方法及应用 (57)摘要 本发明公开了一种从鸡骨草中分离并提取 大黄酚、 木犀草素、 相思子碱及原儿茶酸的方法 及应用， 该方法首次从鸡骨草中分离并提取得到 大黄酚、 木犀草素、 相思子碱及原儿茶酸四种物 种， 可实现鸡骨草中特定化学成分的药理研究， 并为其在制备抗肿瘤药物以及抑制剂药物中的 应用奠定 了基础。 权利要求书1页 说明书16页 附图10页 CN 115433068 A 2022.12.06 CN 115433068 A 1.一种从鸡骨草中分离并提取大黄酚、 木犀草素、 相思子碱及原 儿茶酸的方法， 其特征 在于： 包括以下步骤： S1.将鸡骨草全草干燥且粉碎后， 用8～10倍量的95%乙醇浸泡后于70～80℃回流提取 1h， 重复2 ～3次， 合并提取 液后， 经过滤、 脱除乙醇后， 即得提取浓 缩液； S2.将所述提取浓缩液加水稀释后， 采用乙酸乙酯进行萃取， 萃取比例为1～2∶2～4， 萃 取2～3次， 分别合并萃取相和萃取液， 萃取相和萃取液分别经减压浓缩制得乙酸乙酯部位 浸膏和水部位浸膏； S3.将所述乙酸乙酯部位浸膏用甲醇溶解后， 采用硅胶柱层 析法分离得到Fr.1 ‑3组分、 Fr.4‑7组分和Fr.8 ‑10组分， S4.取所述Fr.1 ‑3组分用乙酸乙酯溶解并过滤， 经浓缩、 冷冻结晶、 干燥后， 即得大黄 酚； S5.取所述Fr.4 ‑7组分用C18柱制备分离， 再 经浓缩、 干燥后， 即得木犀草素； S6.取所述Fr.8 ‑10组分用C18柱制备分离， 再 经浓缩、 干燥后， 即得相思子 碱； S7.取所述水部位浸膏溶解后， 用C18柱制备分离， 再 经浓缩、 干燥后， 即得原儿茶酸。 2.根据权利要求1所述一种从鸡骨草中分离并提取大黄酚、 木犀草素、 相思子碱及原 儿 茶酸的方法， 其特 征在于： 所述 步骤S3中， 硅胶柱层析法满足以下 条件： 拌样硅胶： 20 0～300目； 脱洗剂： 二氯甲烷 ‑甲醇； 梯度脱洗： 40∶ 1 →30∶ 1→20∶ 1→10∶ 1。 3.根据权利要求1所述一种从鸡骨草中分离并提取大黄酚、 木犀草素、 相思子碱及原 儿 茶酸的方法， 其特 征在于： 所述 步骤S5中， C18柱制备分离满足以下 条件： 流动相： 乙腈 ‑0.1%甲酸水， 体积比为3 0∶ 70； 波长： 350 nm。 4.根据权利要求1所述一种从鸡骨草中分离并提取大黄酚、 木犀草素、 相思子碱及原 儿 茶酸的方法， 其特 征在于： 所述 步骤S6中， C18柱制备分离满足以下 条件： 流动相： 0.4%三乙胺 ‑0.2%磷酸， 体积比为18 ∶82； 波长： 280 nm。 5.根据权利要求1所述一种从鸡骨草中分离并提取大黄酚、 木犀草素、 相思子碱及原 儿 茶酸的方法， 其特 征在于： 所述 步骤S7中， C18柱制备分离满足以下 条件： 流动相： 甲醇 ‑0.1%磷酸， 体积比为15∶85； 波长： 260 nm。 6.如权利要求1～5任一项所述方法在制备抗肿瘤药物中的应用。 7.如权利要求1～5任一项所述方法在制备DNA  Topo I抑制剂药物中的应用。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115433068 A 2一种从鸡骨草中分离并提取大黄酚、 木犀草素、 相思子碱及原 儿茶酸的方法及应用 技术领域 [0001]本发明属于中药材提取技术领域， 具体的说， 是一种从鸡骨草中分离并提取大黄 酚、 木犀草素、 相思子 碱及原儿茶酸的方法及应用。 背景技术 [0002]鸡骨草(Abrus  cantoensis)是豆科相思子属的干燥全株植物， 主产于我国岭南地 区， 主要分布于广东、 广西等地， 属于壮药药材之一。 鸡骨草在我国具有悠久的用药历史， 是 一种药食同源的中草药， 其富含多种生物活性成分， 可全草入药。 在民间， 由于鸡骨草药理 作用广泛， 廉价且易栽培， 人们常把鸡骨草用以煲 凉茶、 煲汤等方式食用， 用于解暑 祛湿， 具 有舒肝止痛、 祛湿退黄、 清热解毒等功效。 鸡骨草富含多种生物活性， 如具有抗肿瘤、 抗氧 化、 抗菌抗病毒、 抗炎镇痛、 降脂保肝、 增强免疫力、 促进伤口愈合的作用， 是源于其含有多 糖类、 黄酮类、 生物碱类、 三萜类、 蒽醌类化合物、 微量元素和其他种类等多种化学成分， 临 床上常用于肝炎、 湿热黄疸、 胁肋不舒、 胃脘胀痛、 乳痈肿痛、 跌打内伤等疾病的治疗， 在食 品、 保健品、 药品及化妆品等行业均具有较好的应用潜力。 [0003]鸡骨草虽具有多种生物活性， 但其主要以抗肿瘤、 抗氧化的药理作用被广 泛研究。 例如： 公开号为CN111150752A的发明专利公开了鸡骨草提取物在制备抗癌药物 中的应用， 其中分别研究了鸡骨草石油醚提取物、 鸡骨草乙酸乙酯提取物、 鸡骨草正丁醇提取物和/或 鸡骨草水提物在制备抗癌(尤其是胃癌、 肝癌、 乳腺癌)药物中的应用， 可促进bax蛋白和抑 制bcl‑2 表达来使肿瘤细胞发生凋亡。 又如， 公开号为CN107334688A的发明专利公开了一 种具有抗氧化活性的鸡骨草黄酮及其提取方法和应用， 主要采用酶促催化和乙醇超声提取 的方式来 提取其中的鸡骨草黄酮， 可用于多种护肤品中， 具有抗氧化功能。 [0004]现有研究表明， 鸡骨草不仅具有多种生物活性， 还含有丰富的化学成分， 具有丰富 的药理作用， 但目前针对鸡骨草开展的研究仅仅停留在其中某一类化合物的药效作用上， 例如： 公开号为CN106265865A的发 明专利公开的一种从鸡毛骨草叶或鸡骨草叶中提取酰胺 酸类成分的方法， 公开号为CN104069154A的发明专利公开的一种鸡骨草总皂苷的提取方 法， 以及公开号为CN103989733A的发明专利公开的一种鸡骨草游离氨基酸的粗提方法， 等 等， 并未能深层次开展的针对特定单体化合物的药效学研究。 众所周知， 对中药材中提取并 分离得到的活性单体化合物对研究其作用机制及其与药效关系均具有重要的意义， 因此， 为进一步促进鸡骨草在食品、 保健品、 药品甚至临床的推广和应用， 本发明应运而生。 发明内容 [0005]本发明旨在获取鸡骨草中未知活性单体化合物并研究其药效， 提供了一种从鸡骨 草中分离并提取大黄酚、 木犀草素、 相思子碱及原儿茶酸的方法， 该方法首次从鸡骨草中分 离并提取得到大黄酚、 木犀草素、 相思子碱及原儿茶酸四种物种， 并对其进行研究， 获得了 其在制备抗癌药物、 抗肿瘤药物以及抑制剂药物中的应用。说　明　书 1/16 页 3 CN 115433068 A 3