(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210661485.3 (22)申请日 2022.06.13 (71)申请人 武汉瑞兴生物科技有限公司 地址 430047 湖北省武汉市东湖高新区高 新大道888号高农生物园总部B区15栋 3层 (72)发明人 孙月　全为礼　陈栋　张倩　 刘圆圆　郭浩　 (74)专利代理 机构 武汉科皓知识产权代理事务 所(特殊普通 合伙) 42222 专利代理师 江慧 (51)Int.Cl. C12N 15/113(2010.01) A61K 31/7088(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种靶向PTBP1或PKM2的反义寡核苷酸及在 制备抗宫颈癌药物中的应用 (57)摘要 本发明公开了一种靶向P TBP1或PKM2的反义 寡核苷酸及在制备抗宫颈癌药物中的应用， 在宫 颈癌和许多其他实体瘤癌症中， PTBP1和PKM2的 蛋白水平同等被上调表达了； PTBP1和PKM2在宫 颈癌中上调表达， PKM2是预后靶标。 在HeLa细胞 中分别转染PTBP1或PKM2的ASOs， 有效 降低了靶 标蛋白的表达水平， 并且降低了细胞中的乳酸生 成。 静脉注射P TBP1或PKM2的ASOs， 有效降低了肿 瘤的大小和重量。 发现了ASO ‑PTBP1/PKM2的治疗 价值， 并揭示了其在癌症中调控Warburg效应的 PTBP1和PKM2调控相关的重要机制。 权利要求书1页 说明书6页 序列表1页 附图3页 CN 114908096 A 2022.08.16 CN 114908096 A 1.一种靶向PTBP1或PKM2的反义寡核苷酸， 其特征在于， 所述靶向PTBP1的反义寡核苷 酸的核苷酸序列为： 5 ’ ‑GGCAGGAAATTCTGTATTG‑3’； 所述靶向PKM2的反义寡核苷酸的核苷酸序列为： 5 ’ ‑TTGGTGAGGACGATTATGGC‑3’。 2.根据权利要求1所述的一种靶向PTBP1或PKM2的反义寡核苷酸， 其特征在于， 所述靶 向PTBP1或PKM2的反义寡核苷 酸还包括： 所述反义寡核苷酸至少一个被修饰， 所述修饰包括 磷酸化、 甲基化、 氨基化、 巯基化、 用硫取代氧、 用硒取代氧或同位素化中的至少一种。 3.根据权利要求1所述的一种靶向PTBP1或PKM2的反义寡核苷酸， 其特征在于， 所述反 义寡核苷酸至少一个连接上用于标记或治疗的物质； 所述用于标记或治疗的物质包括： 荧 光标记物、 放射性物质、 治疗性物质、 生物素、 地高辛、 纳米发光材料、 小肽和si RNA中的至少 一种。 4.权利要求1 ‑3所述的靶向PTBP1或PKM2的反义寡核苷酸在制备抗宫颈癌药物中的应 用。 5.一种抗宫颈癌药物， 其特征在于， 所述抗宫颈癌药物包括权利要求1 ‑3所述的靶向 PTBP1或PKM2的反义寡核苷酸。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114908096 A 2一种靶向PTBP1或PKM2的反义寡核 苷酸及在制备抗宫颈癌药 物中的应用 技术领域 [0001]本发明涉及分子生物学技术领域， 特别涉及一种靶 向PTBP1或PKM2的反义寡核苷 酸及在制备抗宫颈癌药物中的应用。 背景技术 [0002]每个人的DNA都与众不同， DNA里的基因序列能编码身体里的每一种蛋白， 如果要 将存储在基因里的信息传递到细胞核外， 就要通过mRNA分子， 它会把遗传信息交给核糖体， 从而生产出指 定的蛋白质， 但是DNA上的错误， 比如基因突变， 能产生有害的蛋白质， 导致疾 病。 但是我们可以针对致病蛋白质所对应的mRNA， 设计出相应的反义寡核苷 酸药物， 反义寡 核苷酸(Antisense  Oligonucleotides， ASOs)是一段由15 ‑25个核苷酸组成的靶基因配对 的单链DNA或RNA序列， 能识别、 结合这些mRNA的特定序列， 通过特异性阻断靶基因的转录或 者翻译过程改变蛋白的表达， 让蛋白的水平降低或是恢复正常， 由于大量蛋白与疾病有关， 并且反义寡核苷酸因具备高度特异性、 高效性和安全低毒等优势， 因此其在治疗一系列疾 病上都有着很大的潜力， 这包括了各种遗传性罕见病、 癌症、 神经疾病、 以及自身免疫疾病 等， 在基因治疗等领域展现出了广阔的应用前 景。 。 [0003]ASOs作用的具体机制是： 15 ‑25个核苷酸长的寡核苷酸能够唯一地与一个目标RNA 结合。 在与靶向RNA结合后， 通过 RNase H1或Argonaute  2(Ago 2)来促进RNA断裂和降解， 或 仅限于占位的机制， 有时被称为空间阻滞机制。 [0004]因此， 有必要开发一种反义寡核苷酸用于制备抗宫颈癌药物。 发明内容 [0005]本发明目的是提供一种靶向PTBP1或PKM2的反义寡核苷酸及在制备抗宫颈癌药物 中的应用。 [0006]为解决上述 技术问题， 本发明采用如下技 术方案： [0007]在本发明的第一方面， 提供了一种靶向PTBP1或PKM2的反义寡核苷酸， 所述靶向 PTBP1的反义寡核苷酸的核苷酸序列为： 5 ’ ‑GGCAGGAAATTCTGTATTG‑3’ [0008]所述靶向PKM2的反义寡核苷酸的核苷酸序列为： 5 ’ ‑TTGGTGAGGACGATTATGGC‑3’ [0009]进一步地， 所述靶向PTBP1或PKM2的反义寡核苷酸还包括： 所述反义寡核苷酸至少 一个被修饰， 所述修饰包括磷酸化、 甲基化、 氨基化、 巯基化、 用硫取代氧、 用硒取代氧或 同 位素化中的至少一种。 [0010]进一步地， 所述反义寡核苷酸至少一个连接上用于标记或治疗的物质； 所述用于 标记或治疗的物质包括： 荧光标记物、 放射性物质、 治疗性物质、 生物素、 地高辛、 纳米发光 材料、 小肽和siRNA中的至少一种。 [0011]在本发明的第二方面， 提供了所述 的靶向PTBP1或PKM2的反义寡核苷酸在制备抗 宫颈癌药物中的应用。说　明　书 1/6 页 3 CN 114908096 A 3