(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210662888.X (22)申请日 2022.06.13 (71)申请人 西南交通大 学 地址 610000 四川省成 都市二环路北一段 (72)发明人 卢晓英　宋华军　江奇　吴文帝　 张兵　 (74)专利代理 机构 成都环泰专利代理事务所 (特殊普通 合伙) 51242 专利代理师 何佰骏 (51)Int.Cl. A61K 41/00(2020.01) A61K 33/42(2006.01) A61P 35/00(2006.01) (54)发明名称 一种用于治疗肿瘤的纳米酶复合物的制备 方法 (57)摘要 本发明公开了一种用于治疗肿瘤纳米酶复 合物的制备方法， 包括以下步骤： 将CNT和钢球球 磨； 取球磨过的CNT进行分散； 依次取尿素， 十二 烷基硫酸钠加入烧杯， 加入分散后CNT溶液； 取硫 酸铁溶于水加入溶液； 取磷酸溶于水加入溶液； 将混合溶液加热冷却抽滤后得FePOs、 CNT复合 物； 将FePOs、 CNT复合物通入H2高温煅烧， 得FeP、 CNT复合物； 称取FeP、 CNT复合物与离子表面活性 剂进行研磨； 另取的离子表面活性剂溶于水， 加 入研磨后的样品， 分散后静置取上层分散液； 取 配置的GO液， 溶于 水后分散； 将CNT分散 液输送到 GO液， 静电自组装； 将碳酸氢铵溶于 水， 加入混合 液中， 静电自组装后进行抽 滤， 得到FeP、 CNT、 GO 复合物， 本发明解决了纳米酶 复合物FePOs、 CNT、 GO或FeP、 CNT、 G O的制备问题。 权利要求书1页 说明书6页 附图3页 CN 115137820 A 2022.10.04 CN 115137820 A 1.一种用于治疗肿瘤的纳米酶复合物的制备方法， 该纳米酶复合物为FePOs、 CNT、 GO的 复合物或F eP、 CNT、 G O的复合物， 其特 征在于， 包括以下步骤： 步骤一： 将CNT和钢球按照45 ‑55:0.5‑1.5的质量比放入球磨罐， 加入无水乙醇浸没钢 球， 进行球磨3 ‑5h， 然后取 出CNT用无 水乙醇和去离 子水清洗， 烘干备用； 步骤二： 取步骤一中球磨、 烘干后的45 ‑55mgCNT， 加入45 ‑55ml去离子水进行超声分散 0.5‑1.5h， 备用； 步骤三： 取一烧杯在其中依次加入尿素2 ‑4g， 十二烷基硫酸钠0.2 ‑0.3g， 去离子水32 ‑ 36ml， 充分溶解， 然后加入步骤二中分散后的40 ‑60mlCNT溶 液， 搅拌均匀； 步骤四： 称取硫酸铁0.05 ‑0.15g， 溶于6 ‑10ml去离子水中， 然后缓慢滴加入步骤三 中搅 拌均匀后的溶 液中， 持续搅拌15 ‑25min； 步骤五： 称取磷酸0.2 ‑0.3g， 溶于6 ‑10ml去离子水， 然后缓慢滴加入步骤四中搅拌均匀 后的溶液， 持续搅拌15 ‑25min； 步骤六： 将步骤五中搅拌均匀后的混合溶液放入反应釜， 加热至135 ‑145℃， 水热反应 1.5‑2.5h， 冷却至室温后进行抽滤， 然后用去离子水和无水乙醇洗涤2 ‑4次， 得到FePOs、 CNT 的复合物， 在5 5‑65℃条件下烘干， 放入干燥塔， 备用； 步骤七： 将步骤六中放入干燥塔的FePOs、 CNT的复合材料放入管式炉中， 通入H2， 在 840‑860℃条件下高温煅烧1.5 ‑2.5h， 得到 FeP、 CNT的复合物， 待冷却后取出FeP、 CNT的复合 物， 放入干燥塔， 备用； 步骤八： 称取步骤七中放入干燥塔的FeP、 CNT的复合物40 ‑60mg， 与90 ‑110mg的离子表 面活性剂进行研磨， 备用； 步骤九： 另称取90 ‑110mg的离子表面活性剂溶于去离子水， 搅拌均匀， 然后将步骤八中 研磨后的样品缓慢加入， 然后超声处理0.5 ‑1.5h， 最后静置25 ‑35min， 弃掉底部的大块沉 淀， 取用上层黑色 分散液， 备用； 步骤十： 取8 ‑12ml配置好的G O液， 溶于 380‑400ml去离子水中， 超声分散25 ‑35min； 步骤十一： 将步骤九中制备的上层黑色分散液CNT分散液通过恒流泵缓慢输送到步骤 十制备好的G O液中， 进行静电自组装1.5 ‑2.5h； 步骤十二： 称取碳酸氢铵450 ‑550mg， 溶于8 ‑12ml去离子水中， 缓慢加入到步骤十一静 电自组装后的混合液中， 再次静电自组装25 ‑35min， 然后将所得溶液进行抽滤， 得到黑色沉 淀FeP、 CNT、 G O的复合物， 用去离 子水和无 水乙醇清洗2 ‑4次， 烘干放入干燥塔， 备用。 2.根据权利要求1所述的一种用于治疗肿瘤的纳米酶复合物的制备方法， 其特征在于， 所述磷酸重量百分比为18 ‑22％。 3.根据权利要求1或2所述的一种用于治疗肿瘤的纳米酶复合物的制备方法， 其特征在 于， 所述离 子表面活性剂为3 ‑磺丙基十四烷基二甲甜菜碱 。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115137820 A 2一种用于治疗肿瘤的纳米 酶复合物的制备方 法 技术领域 [0001]本发明涉及纳米生物学技术领域， 更具体地说， 涉及一种用于治疗肿瘤的纳米酶 复合物的制备 方法。 背景技术 [0002]随着具有类酶活性的纳米酶的出现， 酶疗法抗肿瘤将有机会在实际应用中取得突 破性进展,具有过氧化物酶活性、 过氧化氢酶活性、 氧化 酶活性和超氧化物歧化酶活性的纳 米酶被广泛用于肿瘤治疗领域,在肿瘤治疗中， 常规的物理手段也可以对肿瘤细胞起到有 效杀伤作用， 但是副作用较大， 有研究表明通过相对温和的刺激(声、 光、 电和 磁等)可以诱 导肿瘤细胞凋亡。 [0003]但是目前通过纳米酶治疗肿瘤的研究是相对独立的， 很少有研究探索在外加刺激 条件下纳米酶在抗肿瘤的效果,碳纳米管(碳纳米管(carbon  nanotube， CNT)和石墨烯 (graphene， GO)是一类具有类酶活性的纳米材料， 同时具有一定的电性能， 磁性能和光热性 能， 碳基纳米酶虽然在抗肿瘤方面具有一定作用， 但是由于碳基纳米酶的酶活性并不高， 限 制了其在肿瘤治疗的应用， 而铁基纳米酶通常具有较高的的类酶活性， 在肿瘤治疗方面具 有较好的效果， 因此将铁基纳米材料和碳基纳米材料结合起来形成纳米酶复合物可以增强 其酶活性并对外界刺激进行响应。 发明内容 [0004]本发明要解决的技术问题是提供一种用于治疗肿瘤的纳 米酶复合物的制备方法， 可以实现制备拥有多种酶活性以及能够多刺激响应的FePOs、 CNT、 GO的纳米酶复合物或 FeP、 CNT、 GO 的纳米酶复合物， 可以实现多种刺激条件与 酶活性联合抗骨肿 瘤活性， 揭示纳 米酶在刺激与酶活性协同作用下的分子生物学机理， 为刺激联合纳米酶抗肿瘤奠定理论基 础。 [0005]本发明的技术方案是： 一种用于治疗肿瘤的纳米酶复合物的制 备方法， 该纳米酶 复合物为F ePOs、 CNT、 GO的复合物或F eP、 CNT、 G O的复合物， 包括以下步骤： [0006]步骤一： 将CNT和钢球按照45 ‑55:0.5‑1.5的质量比放入球磨罐， 加入无水乙醇浸 没钢球， 进行球磨3 ‑5h， 然后取 出CNT用无 水乙醇和去离 子水清洗， 烘干备用； [0007]步骤二： 取步骤一中球磨、 烘干后的45 ‑55mgCNT， 加入45 ‑55ml去离子水进行超声 分散0.5‑1.5h， 备用； [0008]步骤三： 取一烧杯在其中依次加入尿素2 ‑4g， 十二烷基硫酸钠 0.2‑0.3g， 去离子水 32‑36ml， 充分溶解， 然后加入步骤二中分散后的40 ‑60mlCNT溶 液， 搅拌均匀； [0009]步骤四： 称取硫酸铁0.05 ‑0.15g， 溶于6 ‑10ml去离子水中， 然后缓慢滴加入步骤三 中搅拌均匀后的溶 液中， 持续搅拌15 ‑25min； [0010]步骤五： 称取磷酸0.2 ‑0.3g， 溶于6 ‑10ml去离子水， 然后缓慢滴加入步骤四中搅 拌 均匀后的溶 液， 持续搅拌15 ‑25min；说　明　书 1/6 页 3 CN 115137820 A 3