(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210667552.2 (22)申请日 2022.06.14 (71)申请人 中山大学附属第五医院 地址 519000 广东省珠海市香洲区梅 华东 路52号 (72)发明人 何欢欢　单鸿　王莉　宫宇娇　 韦嘉幸　刘婕　 (74)专利代理 机构 广州正明知识产权代理事务 所(普通合伙) 44572 专利代理师 张丽 (51)Int.Cl. A61K 48/00(2006.01) A61P 9/12(2006.01) A61P 9/10(2006.01) A61P 35/00(2006.01)A61P 11/00(2006.01) A61P 37/06(2006.01) A61P 9/14(2006.01) A61P 43/00(2006.01) (54)发明名称 血管平滑肌细胞特异性DDX24及其下游分子 在血管发育中的应用 (57)摘要 本发明属于生物医药技术领域， 尤其涉及血 管平滑肌细胞(VSMC)特异性DDX24及其下游分子 在血管发育中的应用。 发现DDX24敲低通过使细 胞周期停滞在G1期而抑制VSMC增殖， VSMC中的 DDX24通过直接结合和稳定 范可尼贫血互补组 蛋 白A(FANCA)mRNA来调节FANCA的表 达。 敲低FANCA 也影响了VSMC的细胞周期和增殖， 而过表达 FANCA减轻了VSMC中由于DDX24缺乏引起的缺陷。 本发明为DDX24在VSMC介导的血管 发育中起 关键 作用提供了 首要证据， 并为VSMC相关病理状况提 供了潜在治 疗靶点。 权利要求书1页 说明书9页 附图10页 CN 115245575 A 2022.10.28 CN 115245575 A 1.DDX24基因或其表达产物在制备调控血管平滑肌细胞功能的产品中的应用， 其特征 在于， 所述血管平滑肌细胞功能包括： (1)细胞周期； (2)细胞增殖； (3)细胞分化； 和(4)细胞 凋亡。 2.DDX24基因或其表达产物在制备治疗由血管平滑肌细胞发育异常以及功能失调引起 的疾病的功能产品中的应用， 其特征在于， 所述血管平滑肌细胞功能包括： (1)细胞周期； (2)细胞增殖； (3)细胞分化； 和(4)细胞凋亡； 所述功能产品对DDX24基因或其表达产物的表 达量具有促进作用。 3.根据权利要求2所述的应用， 其特征在于， 所述血管平滑肌细胞发育异常以及功能失 调引起的疾病包括高血压、 动脉粥样 硬化、 动脉瘤、 肺动脉高压、 移 植血管病、 血管成形术后 再狭窄、 冠状动脉疾病 、 缺血性脑卒中、 烟雾病和血 管发育畸形。 4.根据权利要求3所述的应用， 其特 征在于， 所述功能产品包括以下任一种： (i)以DDX24或FANCA， 或DDX24或FANCA转录本为靶序列， 且能够增强以DDX24或FANCA基 因表达产物的表达； (ii)含有DDX24或FANCA， 或DDX24或FANCA互补序列且能够在转入体内后形成增强 DDX24或FANCA基因表达产物的构建体； (iii)过表达D DX24或FANCA基因序列的免疫相关细胞、 其分化细胞或构建体。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115245575 A 2血管平滑肌细胞 特异性DDX24及其下游分子在血 管发育中的 应用 技术领域 [0001]本发明涉及生物医药技术领域， 更具体地， 涉及血管平滑肌细胞特异性DDX24及其 下游分子在血 管发育中的应用。 背景技术 [0002]血管平滑肌细胞(VSMC)由于其多功能性和可塑性， 在血管发育的各个阶段起着至 关重要的作用。 在血管发育的早期阶段， VSMC表现出迁移和增殖能力增强。 同时， VSMC与内 皮细胞(EC)形成丰富的间隙连接， 这对于血管成熟和血管重塑至关重要。 VSMC发育涉及几 种关键的信号通路。 例如， 血小板衍生生长因子(PDGF ‑BB)和转化生长因子 ‑β(TGF‑β )作为 重要的化学引诱剂， 在VSMC的增殖和分化中发挥多种功能。 这些信号通路缺陷可能导致血 管畸形(VM)或其他血管疾病， 如冠状动脉疾病， 缺血性脑卒中和烟雾病等。 因此， 确 定影响 VSMC发育和功能的分子对于提高我们对胚胎发育的理解和治疗相关疾病至关重要。 [0003]DEAD‑box RNA解旋酶(DDX)主要调控RNA代谢， 在无数的生物过程中至关重要， 例 如细胞生长和器官发育。 DDXs表达失调主要见于癌症和颅面疾病。 最近的突破揭示了DDXs 的关键作用， 即认识到DDX21和DDX5在胚胎淋巴管生成和病理性血管重塑中的重要性， 但 DDXs在VSMC介导的血管发育中的作用仍未确定。 之前发现DDX24中的功能丧失突变与内脏 或MOVLD综合征的主要血管异常有关。 DDX24纯合敲除的小鼠胚胎从胚胎日E  8.5起显示出 缺陷， 并在E14.5之前死亡， 这表明DDX24在胚胎发育中具有不可或缺的作用。 然而， DDX24如 何参与血 管发育和MOVLD致病的具体机制仍待探索。 [0004]范可尼贫血互补组蛋白A(FANCA)是范可尼贫血补体组家族的成员， 已知其参与 DNA修复和复制叉的维持。 有关FANCA的血管疾病已从范可尼贫血扩展到其他疾病， 包括骨 髓(BM)衰竭， 发育缺陷和癌症 易感性。 FANCA敲除小鼠表现出严重的生长 劣势和生育能力降 低。 然而， FANCA在血 管发育中的功能及其调节作用机制仍需要被揭开。 发明内容 [0005]为了克服现有技术存在的上述问题， 本发明提供了DDX24基因或其表达产物与血 管平滑肌功能之间的研究内容。 [0006]本发明的目的通过以下技 术方案实现： [0007]DDX24基因或其表达产物在制备调控血管平滑肌细胞功能的产品中的应用， 所述 血管平滑肌细胞功能包括： (1)细胞周期； (2)细胞增殖； (3)细胞分化； 和(4)细胞凋亡。 [0008]本方法的研究思 路如下： 本 发明首先研究了VSMC中DDX24与胚胎发育的相关性， 发 现VSMC中(不是EC中)的Ddx24是胚胎发育所必需的； VSMC中Ddx24的敲除会导致胚胎中脉管 系统的异常； 并通过胚胎实验发现VSM C中的Ddx24 敲除可诱 导胚胎外组织的血 管缺陷。 [0009]而后， 研究了DDX24对VSMC细胞周期和增殖的调控， 同时， 进一步探究了DDX24介导 的细胞周期调控的分子机制， 结果显示DDX24通过与FANCA的mRNA结合来调节VSMC细胞周期说　明　书 1/9 页 3 CN 115245575 A 3