(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210665356.1 (22)申请日 2022.06.14 (71)申请人 中国医科 大学附属第一医院 地址 110001 辽宁省沈阳市和平区南京北 街155号 (72)发明人 景治涛　蒋炀　张国清　陈炼　 (74)专利代理 机构 沈阳亚泰专利商标代理有限 公司 21107 专利代理师 史力伏 (51)Int.Cl. C12Q 1/6886(2018.01) C12N 15/113(2010.01) A61K 45/00(2006.01) A61K 31/7088(2006.01) A61P 35/00(2006.01)G01N 33/577(2006.01) G01N 33/574(2006.01) (54)发明名称 人脑胶质瘤标志物hsa_circ_0009362及其 应用 (57)摘要 本发明属于生物医药技术领域， 具体涉及到 hsa_circ_0009362基因在胶质瘤临床早期诊断、 治疗以及预后评估中的应用。 一种人脑胶质瘤的 生物标志物， 所述标志物是hsa_cir c_0009362基 因。 hsa_cir c_0009362基因在胶质瘤诊断和预后 判断相关试剂盒中的用途。 hsa_cir c_0009362基 因的抑制剂在制备治疗胶质瘤靶向药物中的应 用， 所述抑制剂能够特异抑制hsa_cir c_0009362 基因的功能。 实验证明hsa_cir c_0009362基因在 体内胶质瘤组织中的表达较正常脑组织中明显 上调， 使得hsa_cir c_0009362基因成为肿瘤辅助 诊断标志物具备可行性。 本发明为胶质瘤诊治提 供了新的理论依据和全新靶点， 也为胶质瘤预后 评估提供方法。 权利要求书1页 说明书6页 序列表2页 附图4页 CN 114921553 A 2022.08.19 CN 114921553 A 1.hsa_circ_0009362基因表达水平的检测试剂在制备脑胶质瘤诊断筛查和/或预后评 估的试剂盒中的应用。 2.根据权利要求1所述的hsa_circ_0009362基因表达水平的检测试剂在制备脑胶质瘤 诊断筛查和/或预后评估的试剂盒中的应用， 其特征在于， 所述试剂盒中包含扩增hsa_ circ_0009362基因的特异性引物、 与hsa_circ_0009362基因核苷酸序列杂交的探针或干细 胞干性标志 物蛋白抗体。 3.根据权利要求2所述的应用， 其特征在于， 所述扩增hsa_circ_0009362基因的特异性 引物序列如SEQ  ID NO.2和SEQ  ID NO.3所示； 所述 抗体为单 克隆抗体或多克隆抗体。 4.根据权利要求1所述的hsa_circ_0009362基因表达水平的检测试剂在制备脑胶质瘤 诊断筛查和/或预后评估的试剂盒中的应用， 其特征在于， 所述的脑胶质瘤诊断筛查和/或 预后评估的试剂盒以hsa_circ_0 009362基因作为标记 物。 5.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于， 所述的脑胶质瘤诊断筛查的试剂 盒是通过 western或定量PCR技术来检测组织中hsa_circ_0009362基因的表达水平， 所述的hsa_ circ_0009362基因表达的程度与脑胶质瘤发生 率呈正相关。 6.根据权利要求4所述的应用， 其特征在于， 所述的脑胶质瘤预后评估试剂盒是通过 Western或定量PCR技术检测组织中hsa_circ_0009362基因 的表达水平， 所述的hsa_circ_ 0009362基因表达的程度与脑胶质瘤的预后生存期呈负相关。 7.hsa_circ_0009362基因表达水平的抑制剂在制备治疗胶质瘤的药物中的应用， 其特 征在于， 所述抑制剂能够抑制hsa_circ_0 009362基因表达水平。 8.根据权利要求7所述的hsa_circ_0009362基因表达水平的抑制剂在制备治疗胶质瘤 的药物中的应用， 其特征在于， 所述抑制剂包括抑制hsa_circ_0009362基因表达的siRNA、 shRNA、 含有siRNA、 shRNA序列的表达载体和/或其他抑制剂化合物； 所述表达载体包括真核 表达载体， 所述真核细胞表达载体包括质粒表达载体或病毒表达载体。 9.如权利要求8所述的应用， 其特征在于， 所述抑制hsa_circ_0009362基因表达的 siRNA序列如SEQ  ID NO:4‑SEQ ID NO:7所示。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 114921553 A 2人脑胶质瘤标志物h sa_circ_0 009362及其应用 技术领域 [0001]本发明属于生物医药技术领域， 涉及到环状RNA： hsa_circ_00009632在胶质瘤的 早期诊断、 临床治疗以及预后评估中的应用。 背景技术 [0002]胶质瘤是中枢神经系统中的一种常见的原发性肿瘤， 恶性程度高， 预后很差。 目前 对胶质瘤主要治疗方法首选为手术切除， 术后辅助化学治疗、 放射治疗等。 由于血脑屏障的 存在， 常用的化疗药物较难到达肿瘤位置发挥作用， 胶质瘤患者的治疗效果仍然很差， 尤其 是胶质母细胞瘤患者的中位生存时间不到15个月。 近年来， 全基因组分子图谱已揭示不同 类型胶质瘤的遗传学和表观分子生物学特征， 由于基因测序技术的迅速发展， 大量有价值 的分子标志物逐渐被发现， 这些分子在胶质瘤诊断、 治疗和预后方面逐渐受到广泛的关注。 因此， 分子靶向治疗有望成为彻底治愈胶质瘤的治疗方式之一。 胶质瘤发生发展的相关致 癌和抑癌基因与胶质瘤患者的早期诊断和临床治疗预后密切相关， 因此寻找胶质瘤基因治 疗的有效靶点， 可以作为评估胶质瘤发病风险、 早期诊断、 临床治疗以及预后评估的重要指 标。 [0003]胶质瘤干细胞 （glioma  stem cells， GSCs） 是恶性胶质瘤中一种特殊类型的细胞， 具有高度自我更新能力并且可以多向分化， 是一种肿瘤起始发生以及后续发展的细胞。 有 临床调查研究表明其与胶质瘤细胞的发生发展、 增殖侵袭、 迁移、 血管形成、 抗凋亡坏死以 及耐药复发等过程有十分紧密的关联。 因此， 靶向胶质瘤干细胞 的分子治疗能够提高胶质 瘤的治疗效果， 从根本上降低术后放化疗的耐受性， 并有效抑制复发， 最 终有望实现胶质瘤 彻底治愈。 研究寻找一种新的高效的胶质瘤特异性分子靶向标志物， 对于恶性胶质瘤的早 期诊断、 临床分子靶向治疗以及预后评估十分重要。 [0004]环状RNA （circular  RNA， circRNA） 是一类具有闭合环状结构的非编码RNA分子， 没 有5’帽结构和3 ’poly(A)尾结构， 由于其特殊结构及不受外切酶影响的属性的存在， 使其可 以稳定表达并且不易降解。 同时， 环状RNA还具有多种多样的生物学功能， 如海绵吸附 miRNA、 调控基因转录、 与有功能的蛋白质结合、 翻译蛋白以及作为多元复合物的支架  。 circRNA功能多样， 并且在体内含量丰富， 有多种基因表达调控方式， 在胶质瘤增殖、 凋亡、 侵袭和迁移 等方面发挥重要作用。 近年来， circRNA在胶质瘤中的作用被逐渐发现以及深入 研究， 具有广泛的临床 应用潜力， 有望成为胶质瘤基因治疗的新的靶点， 从而提高胶质瘤的 诊疗水平， 加长患者 生存期以及降低放 化疗的耐受性。 发明内容 [0005]基于临床问题以及现实技术的角度， 本发明提供了一种人脑胶质瘤标记物 circRNA hsa_circ_0009362， 核酸序列： SEQ  ID NO:1， 及其在恶 性胶质瘤的早期 诊断、 临床 治疗以及预后评估等方面的应用。 发明人基于高通量测序技术发现 同正常组织相比较， 胶 质瘤组织中的hsa_circ_0009362显著高表达， 且随着WHO分级级别升高而升高。 同时， 高表说　明　书 1/6 页 3 CN 114921553 A 3