(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210677047.6 (22)申请日 2022.06.15 (71)申请人 浙江大学 地址 310058 浙江省杭州市西湖区余杭塘 路866号 申请人 浙江寰领医药 科技有限公司 (72)发明人 高建青　吴宏辉　周彦军　 (74)专利代理 机构 杭州求是专利事务所有限公 司 33200 专利代理师 邱启旺 (51)Int.Cl. A61K 9/50(2006.01) A61K 47/46(2006.01) A61P 9/10(2006.01) A61P 35/00(2006.01)A61P 25/28(2006.01) A61P 25/16(2006.01) A61K 9/127(2006.01) (54)发明名称 一种脑内皮细胞靶向仿生纳米递送系统及 其制备方法与应用 (57)摘要 本发明公开了一种脑内皮细胞靶向仿生纳 米递送系统及其制备方法与应用， 本发明利用了 脂质体类膜和干细胞膜两种膜成分的相容性， 构 建了脑内皮细胞靶向仿生纳米递送系统， 所述脑 内皮细胞靶向仿生纳米递送系统包含融合的干 细胞膜与脂质体， 其中干细胞膜表达有VLA ‑4分 子， 该纳米递送系统具备仿生物囊泡结构和磷脂 双分子层， 具有向受损脑内皮细胞靶向作用， 可 负载血脑屏障破坏相关疾病药物进行靶向递送， 所涉及的制备方法简便， 条件可控， 具有良好的 临床转化可能性。 权利要求书1页 说明书6页 附图7页 CN 115025063 A 2022.09.09 CN 115025063 A 1.一种脑内皮细胞靶向仿生纳米递送系统， 其特征在于， 所述脑内皮细胞靶向仿生纳 米递送系统包 含融合的干细胞膜与脂质体， 其中干细胞膜 表达有VLA ‑4分子。 2.根据权利要求1所述的脑内皮细胞靶向仿生纳米递送系统， 其特征在于， 所述干细胞 膜选自间充质干细胞膜、 神经干细胞膜和造血干细胞膜的一种或几种。 3.根据权利要求1所述的脑内皮细胞靶向仿生纳米递送系统， 其特征在于， 所述脑内皮 细胞靶向仿生纳米递送系统的粒径为5 0～300nm。 4.根据权利要求1所述的脑内皮细胞靶向仿生纳米递送系统， 其特征在于， 所述脑内皮 细胞靶向仿生纳米递送系统对受损并高表达VCAM ‑1分子的脑血 管内皮细胞 具有靶向能力。 5.根据权利要求1所述的脑内皮细胞靶向仿生纳米递送系统， 其特征在于， 所述脂质体 的组成为蛋黄卵磷脂、 大豆卵磷脂、 二棕榈酰磷脂酰胆碱、 二硬脂酰磷脂酰胆碱中的一种或 多种。 6.根据权利要求1所述的脑内皮细胞靶向仿生纳米递送系统， 其特征在于， 脂质体与干 细胞膜蛋白的质量比例为1:0.1～4。 7.一种权利要求1 ‑6任一所述的脑内皮细胞靶向仿生纳米递送系统的制备方法， 其特 征在于， 具体为： 将表达有V LA‑4分子的干细胞膜与脂质体采用机械共挤出法或超声法使两 者融合， 得到脑内皮细胞靶向仿生纳米递送系统。 8.根据权利要求6所述的制备方法， 其特征在于， 所述表达有VLA ‑4分子的干细胞膜通 过如下方法获得： 将干细胞放入 液氮中60 s速冻后迅速置于37℃水浴锅中进 行复融， 如此反 复3次后， 转移至玻璃匀浆器中并至于冰上匀浆10～100次。 随后， 将匀浆液在20000 ×g， 30min， 4℃条件下离心， 收集上清液再在 100000×g， 30min， 4℃条件下离心并收集沉淀， 即 得表达有VLA ‑4分子的干细胞膜。 9.一种权利要求1 ‑6任一所述脑内皮细胞靶向仿生纳米递送系统在制备治疗血脑屏障 破损相关疾病药物中的应用。 10.根据权利要求9所述的应用， 其特征在于， 所述血脑屏障破损相关疾病包括出血性 脑卒中、 缺血性脑卒中、 恶行脑胶质瘤和阿兹海默症和帕金森病。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115025063 A 2一种脑内皮细胞靶向仿生纳米递 送系统及其制备方 法与应用 技术领域 [0001]本发明属于药物递送系统制备领域， 尤其涉及一种脑内皮细胞靶向仿生纳米递送 系统及其制备 方法与应用。 背景技术 [0002]血脑屏障(Blood ‑brain barrier， BBB)是由软脑膜、 脉络丛、 脑微血管和星状胶质 组织所组成的生物屏障。 其分隔了脑组织与循环系统， 可有效防止外周循环系统中的细胞、 细菌和内毒素等进入脑内， 维持脑内稳态。 BBB的内皮细胞通过紧密连接相互串联， 其紧密 连接属于不通透连接， 由紧密连接蛋白形成的索状结构将两相邻细胞连接起来， 从而封闭 细胞间隙。 因此。 BBB的高选择性和低渗透性也阻碍了疾病发生后向脑部的药物传递， 限制 了疗效发挥。 脑微血管内皮细胞(Brain  microvascular  endothelial  cells， BMECs)是血 脑屏障的基础， 在脑卒中发生后， 由于大量炎症因子的产生和流体剪切力的改变， 脑微血管 内皮细胞的细胞骨架和形态发生变化， 紧密连接(Tight  junction， TJ)打开进而导致血脑 屏障完整性被破坏， 因此为靶向递送系统的构建提供了基础。 炎症环境下， 内皮细胞表面的 黏附分子的表达水平被上调， 循环系统中的单核细胞、 中性粒细胞等可通过黏附分子黏附 在受损内皮细胞表 面， 进而发生变形并浸润至病灶中。 因而， 此类黏附分子可以作为脑和受 损血脑屏障靶向递送系统设计的备选靶标。 [0003]近年来， 基于纳米制备技术的纳米递送系统在靶向药物递送中展现出独特的优 势。 其中脂质体作为商品化程度最高的纳米制剂之一， 因其具有较高的生物相容性， 灵活的 修饰能力和较为简易的制备方法而受到研究者的青睐。 如公开号为CN111920768A的中 国专 利公开了一种包载分子靶向药物的脂质体及其在制备治疗肿瘤药物中的用途。 本发明的分 子靶向药物脂质体由分子靶向药物、 脂质体成分如磷脂、 胆固醇mPEG ‑DSPE和/或靶向分子 修饰的PEG‑DSPE等组成。 该发 明通过主动或被动载药方式将分子靶向药物包载入脂质体内 水相或磷脂双分子层制备而成， 显著增强分子靶向药物抗肿瘤尤其是抗脑部肿瘤的效果。 进一步所述分子靶向药物脂质体与药学上可接受的药用成分和/或稀释剂的组合制成各种 剂型， 具有潜在临床应用。 随着对天然来源生物材料的研究不断深入， 可将生物天然功能嫁 接至纳米递送系统中。 如申请号为ZL201710686283.3的中国专利公开了一种利用干细胞携 载治疗基因实现了对缺血性脑卒中的有效治疗。 该发明将干细胞作为药物的载体， 能够将 药物靶向递送至病灶部位， 实现靶向递送药物。 然而， 细胞载体在制备、 载药、 储存等环节要 求较高， 且其载药量和载药种类受限， 整体成本较高。 此外， 由于细胞载体仍具有一定活性， 在体内循环中可能存在一定的安全隐患， 因此， 如何进一步提高递药系统的治疗效果是目 前本领域亟需解决的技 术问题。 发明内容 [0004]本发明的目的在于提供一种脑内皮细胞靶向仿生纳米递送系统及其制备方法和 应用， 该脑内皮细胞靶向仿生纳米递送系统可提升脂质体递送系统对受损血脑屏障的靶向说　明　书 1/6 页 3 CN 115025063 A 3