(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210689692.X (22)申请日 2022.06.17 (71)申请人 中国科学院合肥物质科 学研究院 地址 230031 安徽省合肥市蜀山区蜀山湖 路350号 (72)发明人 黄青　郑鑫鑫　 (74)专利代理 机构 合肥市浩智运专利代理事务 所(普通合伙) 34124 专利代理师 叶濛濛 (51)Int.Cl. G01N 21/33(2006.01) G01N 21/01(2006.01) G01N 21/03(2006.01) (54)发明名称 一种评价虾青素抗 光照氧化能力的方法 (57)摘要 本发明涉及虾青素抗氧化能力检测技术领 域， 具体来 说评估虾青素对抗光照氧化的的评估 方法。 通过选择对虾青素合适的光敏剂、 活性氧 探针、 光照时间、 反应试剂 浓度、 以及光谱测量方 式和方法， 可以实现虾青素抗光照氧化能力的评 估。 这是首次建立针对虾青素的抗光照氧化能力 的实验方案和检测方法。 该专利对实验设备要求 低， 具有简单便捷、 易于操作、 测量准确可靠、 可 定量分析的优点。 权利要求书2页 说明书8页 附图3页 CN 115201135 A 2022.10.18 CN 115201135 A 1.一种评价虾青素抗 光照氧化能力的方法， 其特 征在于： 建立评估虾青素对抗光照氧化的实验方案及评估方法： 以亚甲基蓝为光敏剂， 利用氙 灯辐照， 加660nm的滤光片， 在光照条件 下产生单线态氧； 以DPBF为探针探测单线态氧， 添加 不同浓度虾青素， 采用紫外 ‑可见光吸收光谱法， 检测DPBF在380 ‑440nm吸收峰的变化， 判断 虾青素对单线态氧的清除作用； 以不含虾青素的样品为对照， 并根据以下公式计算虾青素对单线态氧的淬灭常数kr： S0/S＝1+kr[A]/(kd+kQ[P]) 其中， S0表示不含虾青素样品的D PBF探针起始减少速率； S表示含有虾青素样品的D PBF探针起始减少速率； [A]表示虾青素的起始浓度， [ P]表示DPBF的起始浓度； kd表示单线态氧自身的衰减速率常数； kQ表示单线态氧与D PBF反应的速率常数； 通过kr判断虾青素对单线态氧的清除能力。 2.根据权利要求1所述的一种评价虾青素抗光照氧化 能力的方法， 其特征在于： 包括以 下步骤： (1)将虾青素用有机溶剂溶解制成母液， 然后无水乙醇稀释为虾青素备用液； 将DPB F用 无水乙醇溶解 为DPBF‑乙醇溶液， 亚甲基蓝用去离 子水溶解为亚甲基蓝 ‑水溶液； (2)将虾青素备用液、 DPB F‑乙醇溶液、 亚甲基蓝 ‑水溶液加入比色皿中， 用乙醇 ‑水混合 溶液补满后， 将比色皿封口； 以无 水乙醇作为对照； (3)对上述含有虾青素的样品及对照样品进行光照后， 利用紫外 ‑可见分光光度计对样 品进行扫描， 观察D PBF在380 ‑440nm吸收峰的变化； (4)根据DPBF吸收峰的变化计算含虾青素样品及对照样品中DPBF探针的起始减少速 率， 代入公式计算虾青素对单线态氧的淬灭常数kr。 3.根据权利要求1所述的一种评价虾青素抗光照氧化 能力的方法， 其特征在于： 所述步 骤(2)中D PBF和亚甲基蓝的终浓度分别为6 μmo l/L和6 μmo l/L。 4.根据权利要求1所述的一种评价虾青素抗光照氧化 能力的方法， 其特征在于： 所述步 骤(2)中乙醇 ‑水混合溶液中乙醇和水的体积比为67％ ‑100％， 具体百分比需根据情况而 定， 必须有效溶解脂溶性 抗氧化剂虾青素， 避免溶 液变浑浊。 5.根据权利要求1所述的一种评价虾青素抗光照氧化 能力的方法， 其特征在于： 所述步 骤(2)的比色皿中虾青素的浓度为0.5 ‑2.0 μmol/L。 6.根据权利要求1所述的一种评价虾青素抗光照氧化 能力的方法， 其特征在于： 所述步 骤(2)的比色皿中D PBF的浓度为6～10 μmo l/L， 亚甲基蓝的浓度为6～ 9 μmol/L。 7.根据权利要求1所述的一种评价虾青素抗光照氧化 能力的方法， 其特征在于： 所述步 骤(3)中以氙灯作为 诱导亚甲基蓝产生单线态氧的光源， 其 光照强度可调。 8.根据权利要求7所述的一种评价虾青素抗光照氧化 能力的方法， 其特征在于： 所述步 骤(3)中采用滤光片除去氙灯发射 光线中的杂光， 透过光波长为6 60nm。 9.根据权利要求1所述的一种评价虾青素抗光照氧化 能力的方法， 其特征在于： 所述步 骤(3)中样品的光照时间为0～120s。 10.根据权利要求1所述的一种评价虾青素抗光照氧化能力的方法， 其特征在于： 所述权　利　要　求　书 1/2 页 2 CN 115201135 A 2步骤(4)计算虾青素对单线态氧的淬灭常数kr公式中的kd在水中为3 ×105s‑1， 在乙醇中为 6.7×104s‑1； kQ为8x108 mol‑1s‑1。权　利　要　求　书 2/2 页 3 CN 115201135 A 3