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(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210773283.8 (22)申请日 2022.07.01 (71)申请人 江苏诺鬲 生物科技有限公司 地址 225300 江苏省泰州市医药高新 技术 产业开发区中国医药城口泰路西侧、 陆家路东侧0 009幢G73三层东侧 (72)发明人 咸涛 磨国鑫 肖漓 赵小琼 张兴全 (51)Int.Cl. G01N 21/01(2006.01) G01N 21/64(2006.01) (54)发明名称 一种自动确定荧光暗场相机聚焦位置的方 法和装置 (57)摘要 本发明提供一种自动确定荧光暗场相机聚 焦位置的方法和装置, 所述方法包括: 获取载玻 片不同聚焦位置的免疫荧光图片; 对免疫荧光图 片进行灰度处理, 形成免疫荧光图片的第一信息 集合; 对免疫荧光图片进行模糊处理和灰度处 理, 形成免疫荧光图片 的第二信息集合; 基于第 一信息集合和第二信息集合计算免疫荧光图片 的MSE值, MSE值作为免疫荧光图片的清晰度值。 本发明提供的自动确定荧光暗场相机聚焦位置 的方法可有效快速确定荧光暗场相机的聚焦位 置, 调焦速度快, 效率高, 便 于自动化操作。 权利要求书1页 说明书6页 附图4页 CN 115308129 A 2022.11.08 CN 115308129 A 1.一种自动确定荧 光暗场相机聚焦位置的方法, 其特 征在于, 包括如下步骤: 获取载玻片不同聚焦位置的免疫免疫荧 光图片; 对免疫荧光图片进行灰度处理, 然后利用二维一级小波变化计算免疫荧光图片的水平 信息、 竖直信息和对角线信息, 形成免疫荧 光图片的第一信息集 合; 对免疫荧光图片进行模糊处理和灰度处理, 再利用哈尔小波计算免疫荧光图片水平信 息、 竖直信息和对角线信息, 形成免疫荧 光图片的第二信息集 合; 基于第一信息集合和第二信息集合计算免疫荧光图片的MSE值, MSE值作为免疫荧光图 片的清晰度值。 2.根据权利要求1所述的方法, 其特征在于, 所述二维一级小波变化为Daubechies小波 或哈尔小 波。 3.根据权利要求1所述的方法, 其特征在于, 模糊处理采用高斯模糊处理或拉普拉斯模 糊处理。 4.根据权利要求1所述的方法, 其特征在于, MSE值采用如下计算公式计算: 其中, yi代表v1, h1, c1中的值, 代表v2, h2, c2中的值, wi等于1, SSE为总差值; n为免疫 荧光图片的像素点个数; m为免疫荧 光图片的像素点个数。 5.一种自动确定荧 光暗场相机聚焦位置的装置, 其特 征在于, 包括: 获取模块, 获取 载玻片不同聚焦位置的免疫荧 光图片; 第一信息集合获取模块, 对免疫荧光图片进行灰度处理, 然后利用二维一级小波变化 计算免疫荧光图片的第一水平信息、 第一竖直信息和对角线信息, 形成免疫荧光图片的第 一信息集 合; 第二信息集合获取模块, 对免疫荧光图片进行模糊处理和灰度处理, 再利用哈尔小波 计算免疫荧光图片的第第二水平信息、 第二竖直信息和第二对角线信息, 形成免疫荧光图 片的第二信息集 合; 免疫荧光图片清晰度值计算模块, 配置为基于第 一信息集合和第 二信息集合计算荧光 图片的MSE值, MSE值作为免疫荧 光图片的清晰度值。 6.一种电子设备, 包括存储器、 处理器及存储在存储器上并可在处理器上运行的计算 机程序, 其特征在于, 所述处理器执行所述程序时实现如权利要求1~4任一项所述的自动 确定荧光暗场相机聚焦位置的方法。 7.一种非暂态计算机可读存储介质, 其上存储有计算机程序, 其特征在于, 该计算机程 序被处理器执行时实现如权利要求1~4任一项所述的自动确定荧光暗场相 机聚焦位置的 方法。权 利 要 求 书 1/1 页 2 CN 115308129 A 2一种自动确定荧光暗场相机聚焦位置的方 法和装置 技术领域 [0001]本发明涉及 荧光暗场检测技术领域, 具体涉及一种自动确定荧光暗场相机聚焦位 置的方法及装置 。 背景技术 [0002]免疫荧光染色图片一般由荧光暗场相机采集特定波段的荧光形成, 以此来找到病 灶细胞或病灶细菌所在位置和数量。 [0003]传统的荧光暗场检测装置在获取免疫荧光染色图片的流程如下: 人工手动调整显 微镜物镜到载玻片之 间的距离(即荧光暗场相机的聚焦位置), 待观察到清晰的病灶细胞或 病灶细菌时, 停止调整显微镜物镜到载玻片之间的距离, 荧光暗场相 机对显微镜观察到的 清晰的病灶细胞或病灶细菌进行拍摄, 获得免疫荧光图片。 上述传统获取免疫荧光图片的 过程中, 需要人工手动调节显微镜物镜到载玻片之间的距离(即手动调节荧光暗场相 机的 聚焦位置), 调节速度慢, 效率低, 不利用自动化操作。 发明内容 [0004]因此, 本发明要解决的技术问题在于克服现有技术中的获取清晰免疫荧光图片速 度慢、 效率低的问题, 从而提供一种自动确定荧 光暗场相机聚焦位置的方法及装置 。 [0005]本发明的一个方面, 提供一种自动确定荧光暗场相机聚焦位置 的方法, 包括如下 步骤: [0006]获取载玻片不同聚焦位置的免疫荧 光图片; [0007]对免疫荧光图片进行灰度处理, 然后利用二维一级小波变化计算荧光图片的水平 信息、 竖直信息和对角线信息, 形成免疫荧 光图片的第一信息集 合; [0008]对免疫荧光图片进行模糊处理和灰度处理, 再利用哈尔小波计算荧光图片的水平 信息、 竖直信息和对角线信息, 形成免疫荧 光图片的第二信息集 合; [0009]基于第一信息集合和第二信息集合计算免疫荧光图片的MSE值, MSE 值作为荧光 图片的清晰度值, 根据免疫荧 光图片的清晰度值 来确定聚焦平面 位置或聚焦位置 。 [0010]优选的, 所述 二维一级 小波变化为Daubec hies小波、 哈尔小 波中的一种。 [0011]优选的, 模糊处 理采用高斯模糊处 理或拉普拉斯模糊处 理。 [0012]进一步地, 所述MSE值采用如下计算公式计算: [0013] [0014]其中, yi代表v1, h1, c1中的值, 代表v2, h2, c2中的值, wi等于1, SSE为总差值; n 为 免疫荧光图片像素点个数; m为免疫荧 光图片像素点个数。 [0015]本发明要解决的另一个技术问题在于克服现有技术中的荧光暗场相机聚焦位置 不准确的缺陷, 从而提供一种自动确定荧 光暗场相机聚焦位置的装置, 包括: [0016]获取模块, 获取 载玻片不同聚焦位置的免疫荧 光图片;说 明 书 1/6 页 3 CN 115308129 A 3
专利 一种自动确定荧光暗场相机聚焦位置的方法和装置
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