(19)国家知识产权局 (12)发明 专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请 号 202210774369.2 (22)申请日 2022.07.01 (71)申请人 德州学院 地址 253011 山东省德州市德 城区大学西 路566号 (72)发明人 边炳润　雷洪　曲雅琨　白向茹　 吴玉泾　肖志伟　 (74)专利代理 机构 南京司南专利代理事务所 (普通合伙) 32431 专利代理师 温烈 (51)Int.Cl. G01N 21/01(2006.01) G01N 21/64(2006.01) (54)发明名称 一种农药残留快速 检测方法 (57)摘要 本发明涉及农业技术领域， 尤其涉及一种农 药残留快速检测方法， 解决了现有技术中现有的 检测操作较为繁琐， 需要预先配置检测溶液之后 通过抽检样品进行检测， 无法满足快速检测的要 求， 同时现有检测之后的对比需要通过比色卡进 行， 而比色卡一旦丢失会造成检测进度停滞， 降 低检测的效率的问题。 一种农药残留快速检测方 法， 包括检测试剂条存放盒、 检测试剂条和移动 端APP， 检测试剂条存放盒的顶部一侧设置有比 色卡， 比色卡顶部设置有防划膜， 移动端APP显示 有比色卡图片， 将检测试剂条通过移动端的摄像 头进行拍摄采集， 移动端将采集到的图片上传到 APP内， 通过算法与比色卡图片自动进行对比。 本 发明大大简化了检测的步骤， 提高了检测的效 率。 权利要求书1页 说明书4页 CN 115165739 A 2022.10.11 CN 115165739 A 1.一种农药残留快速检测方法， 其特征在于， 包括检测试剂条存放盒、 检测试剂条和 移 动端APP， 检测试剂条存放盒的顶部一侧设置有比色卡， 比色卡顶部设置有防划膜， 移动端 APP显示有比色卡图片， 将 检测试剂条通过移动端的摄像头进 行拍摄采集， 移动端将采集到 的图片上传到APP内， 通过算法与比色卡图片自动进 行对比， 将比色结果通过显示屏进 行显 示， 检测试剂条的制作包 含以下步骤： 准备实验试剂： 荧光素： 1 ‑3mg荧光素粉剂加3 ‑10ml水溶解制成溶液， 再按溶液重量50倍加纯净水稀释 制成荧光素溶液， 分装后在 ‑20℃以下冷冻保存备用； 荧光素酶： 2 ‑5mg荧光素酶加5 ‑15ml水溶解制成溶液， 再按溶液重量50倍纯净水稀释制 的荧光素酶溶 液， 分装后在 ‑20℃以下冷冻保存备用； ATP： 取1‑5mmol/L标准的ATP溶 液， 或者取ATP粉剂用纯 净水稀释到该浓度备用； 缓冲液： 通过常量天平按照3 ‑6份HEPES、 2 ‑5份EDTA和8 ‑12份醋酸镁加入10 ‑15份纯净 水定容， 过 滤除菌制成 缓冲溶液， 包装在4℃保存备用； 将以上溶液进行均匀混合在容器中， 将检测试剂条放入容器浸泡之后烘干； 样品提取液制备： 选取待检验的蔬菜样品， 冲洗掉表面泥土， 剪成0.8 ‑1.2cm 2碎片， 取 样品1g， 放入烧杯或提取瓶中， 加入3 ‑15mL所述 缓冲溶液， 振荡1min ‑2min， 除去样品沉渣制 得提取液， 静置3min‑5min， 待用； 样品检测： 保持检测温度在25℃， 将样品和检测试剂条放入容器至样品溶液将检测试 剂条浸透， 通过与检测试剂条存放盒和比色卡对比或者 通过移动端AP P进行自动检测。 2.根据权利要求1所述的一种农药残留快速检测方法， 其特征在于， 所述荧光素为北美 萤火虫萤光素。 3.根据权利要求1所述的一种农药残留快速检测方法， 其特征在于， 所述荧光素酶为北 美萤火虫荧 光素酶。 4.根据权利要求1所述的一种农药残留快速检测方法， 其特征在于， 所述检测仪为荧光 检测仪或超微弱光分析仪 。 5.根据权利要求1所述的一种农药残留快速检测方法， 其特征在于， 试剂的取样步骤 为： 步骤1： 将待测样品置 于离心管中； 步骤2： 加入试剂A,振摇； 步骤3:加入试剂B,振摇； 步骤4:静置或离心,吸取 上清液。 6.根据权利要求5所述的一种农药残留快速检测方法， 其特征在于， 待测样品为按照相 关标准经 过前期制备的样品,包括蔬菜水果需除去尘土及非食用部分。 7.根据权利要求5所述的一种农药残留快速检测方法， 其特 征在于， 待测样品取1 ‑10g。 8.根据权利要求5所述的一种农药残留快速检测方法， 其特征在于， 静置时间为10～30 分钟。权　利　要　求　书 1/1 页 2 CN 115165739 A 2一种农药残留快速检测方 法 技术领域 [0001]本发明涉及 农业技术领域， 尤其涉及一种农药残留快速检测方法。 背景技术 [0002]农业产业化的快速发展， 农产品的生产越来越依赖于农药、 抗生素和激素等外源 物质， 有些农作物从幼苗开始一直用大剂量农药进行浸泡。 而且我国农药在农产品的用量 居高不下， 不仅影响周边环境而且这些物质的不合理使用必将导致农产品中的农药残留超 标， 影响消费者食用安全， 严重时会造成消费者致病、 发育不正常， 甚至直接导致中毒死亡 等严重后果； 对于 国际贸易方面农药残留超标也影响农产品的贸易， 世界各国对农药残留 问题高度重视， 对各种农副产品中的农药残留都做出了越来越近似苛刻的限量标准， 使得 我国农产品出 口面临严峻的挑战， 因此对于农药残留的快速检测的方法， 也成为了世界各 国重点的研究对象， 究其原理来说主要分为两大类： 生化测定法和色谱检测法。 其中生化测 定法中的酶抑制率法由于具有快速、 灵敏、 操作简便、 成本低廉等特点， 被列为国家推荐标 准方法(GB/T  5009.199 ‑2003)， 已成为对果蔬中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留进行现场 快速定性初筛检测的主流 技术之一， 得到 了越来越广泛的应用。 [0003]这种方法检测原理简单表示如下： [0004]底物+显色剂； [0005]黄色反应物； [0006]控制反应物的量和 反应条件使该过程在3分钟内平稳反应， 产物浓度和酶的活性 成线性关系， 若反应物中有农药存在， 酶活性被抑制， 产 物浓度降低， 反应溶液在3 分钟后的 颜色相当于正常情况要浅， 通过紫外 分光度计等仪器测定反应3 分钟前后吸光度差值， 再对 比空白反应， 得出酶的受抑制程度， 从而判断农药是不是超标； 但是这种方法也有一些缺点 和局限性， 最明显的就是检测精确度不高， 目前能检测的最低检出限为0.1ppm， 并且色素对 检测的干扰非常严重， 对于部分农产品， 由于含有类似底物的组织次生物而无法正常检测。 在CN 1632538A中公开了一种农药残留高灵敏度快速检测方法， 其特征在于： 以荧光探针作 为指示剂， 指示有机磷农药和氨基甲酸脂类农药对胆碱脂酶活性的抑制程度， 或者指示所 述农药对有机磷水解酶水解反应的进程； 通过荧光强度的变化测定农药残留量。 本发明提 供的高灵敏度的农药残留检测的新方法对有机磷农药和氨基甲酸脂类农药的检测限， 以吠 喃丹为标准物质， 检测限可以达 到2u g/kg。 [0007]然而， 现有的检测操作较为繁琐， 需要预先配置检测溶液之后通过抽检样品进行 检测， 无法满足快速检测的要求， 同时现有检测之后的对比需要通过比色卡进 行， 而比色卡 一旦丢失会造成检测进度停滞， 降低检测的效率。 发明内容 [0008]本发明的目的是提供一种农药残留快速检测方法， 解决了现有技术中现有的检测 操作较为繁琐， 需要预先配置检测溶液之后通过抽检样品进行检测， 无法满足快速检测的说　明　书 1/4 页 3 CN 115165739 A 3