ICS 11.220 B 41 中华人民共和国国家标准 GB/T18644—2020 代替GB/T18644—2002 猪囊尾呦病诊断技术 Diagnostic techniques for porcine cysticercosis 2020-12-14实施 2020-12-14发布 国家市场监督管理总局 发布 国家标准化管理委员会 GB/T18644—2020 目 次 前言 引言 1 范围 2 规范性引用文件 3 缩略语 显微镜检查 4.1 试剂 4.2 仪器设备 4.3 虫体采集 4.4 压片制备 4.5 显微镜检查 4.6 显微镜检查结果判定 PCR法 5.1 试剂 5.2 仪器设备 5.3 引物 5.4 样品 5.5 PCR操作程序 5.6 扩增产物电泳检测 5.7 试验成立条件 5.8 PCR结果判定 6 间接ELISA 6.1 试剂 6.2 仪器设备 6.3 样品 6.4 试验步骤 6.5 试验成立条件 6.6 ELISA结果判定 7 Dot-ABC-ELISA 7.1 试剂 7.2 仪器设备 7.3 样品 7.4 试验步骤 7.5 试验成立条件 7.6 Dot-ABC-ELISA结果判定 综合判定 GB/T18644—2020 附录A（规范性附录） 生理盐水及猪囊尾蝴头节形态特征 附录B（规范性附录） PCR引物位置、溶液配制及电泳结果 10 附录C（规范性附录） ELISA试剂及其配制· 12 附录D（资料性附录） 猪囊尾TS-CC18重组蛋白的制备 14 附录E（资料性附录） 间接酶联免疫吸附试验的加样 16 附录F（资料性附录） 猪囊尾蝴TS-CC18和烯醇化酶单克隆抗体的制备 17 附录G（资料性附录) Dot-ABC-ELISA相关试剂配制及结果判定 20 GB/T 18644—2020 前言 本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草 本标准代替GB/T18644—2002《猪囊尾坳病诊断技术》，与GB/T18644—2002相比，除编辑性修 改外，主要技术变化如下： 范围部分增加了PCR和Dot-ABC-ELISA技术（见第1章）； 一增加了缩略语部分（见第3章）； 增加了病原的PCR检测方法（见第5章）： 2002年版的第3章）； 增加了检测循环抗原的Dot-ABC-ELISA方法（见第7章）： 增加了综合判定（见第8章）； 一增加了生理盐水及猪囊尾头节图片（见附录A）,PCR引物位置、溶液配制及电泳图片（见附 录B），ELISA试剂及其配制（见附录C，2002年版的附录A），猪囊尾坳TS-CC18重组蛋白的 制备（见附录D)，间接酶联免疫吸附试验加样示例（见附录E)，猪囊尾蜘TS-CC18和烯醇化 酶单克隆抗体的制备（见附录F）,Dot-ABC-ELISA相关试剂配制及结果判定（见附录G）。 请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。 本标准由中华人民共和国农业农村部提出。 本标准由全国动物卫生标准化技术委员会（SAC/TC181）归口。 本标准起草单位：中国农业科学院兰州兽医研究所。 本标准主要起草人：才学鹏、骆学农、张少华、郑亚东、郭爱疆、侯俊玲 本标准所代替标准的历次版本发布情况为： GB/T18644—2002。 GB/T18644—2020 引言 猪囊尾呦病（porcinecysticercosis）是由猪带终虫（Taeniasolium）的幼虫所引起的一种危害严重的 人兽共患寄生虫病。世界动物卫生组织将该病列为需申报的疾病之一。目前，该病广泛存在于发展中 国家，而且发达国家的病例也有逐年增加的趋势，不仅影响养猪业的发展，造成巨大的经济损失，而且还 严重威胁人类健康。 猪囊尾蜘病的诊断包括病原学诊断与血清学诊断。病原学诊断的目的在于确定临床检样本中虫 体的形态特征，在显微镜下观察头节顶突上有内外两圈排列整齐的小钩，即可判为猪囊尾坳。若囊尾坳 主要寄生于肝脏，则要注意与亚洲带终虫囊尾坳相区别。目前，该病的生前诊断主要采用血清学方法， 所用的抗原有虫体抗原、囊液抗原或分泌代谢抗原等，虽然这些抗原的检测敏感性较高，但特异性差，而 且抗原来源非常有限。鉴于以上原因，本次对GB/T18644一2002《猪囊尾坳病诊断技术》的修订，除间 接ELISA所用抗原改为猪囊尾坳期特异性18ku基因（TS-CC18)重组蛋白外，还增加了血清循环抗原 （CAg）检测方法和病原的PCR检测方法，以满足猪囊尾蜘病流行病学调查、药物治疗效果评价和动物 流通风险评估等不同需求。 本文件的发布机构提请注意，声明符合本文件时，可能涉及到第6章间接酶联免疫吸附试验 (ELISA）相关的专利使用。 本文件的发布机构对于该专利的真实性、有效性和范围无任何立场 就专利授权许可进行谈判。该专利持有人的声明已在本文件的发布机构备案。相关信息可以通过以下 联系方式获得： 专利持有人姓名：才学鹏、张少华、景志忠、骆学农、郭爱疆、郑亚东、窦永喜。 地址：甘肃省兰州市盐场堡徐家坪1号 请注意除上述专利外，本文件的某些内容仍可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专 利的责任。 IV