ICS 11.020 C 05 团体标准 T/CPMA 009—2020 艾伯特埃希菌分离及鉴定方法 Isolation and identification of Escherichia albertii 2020 -07-01发布 2020 -10-01实施 中华预防医学会 发 布 全国团体标准信息平台 T/CPMA 009 -2020 I 目 次 前言 .................................................................................................................................................................... II 引言 .................................................................................................................................................................. III 1 范围 .............................................................................................................................................................. 1 2 术语和定义 .................................................................................................................................................. 1 3 缩略语 .......................................................................................................................................................... 1 4 设备和材料 .................................................................................................................................................. 2 5 培养基和试剂 .............................................................................................................................................. 2 6 分离和鉴定程序 .......................................................................................................................................... 3 7 操作步骤 ...................................................................................................................................................... 4 8 生物安全 ...................................................................................................................................................... 6 附录 A（资料性附录） 艾伯特埃希菌病原学 ............................................................................................ 7 附录 B（规范性附录） 培养基和试剂 ........................................................................................................ 9 附录 C（规范性附录） eae、cdtB、stx 2毒力基因检测和 MLST分析 ................................................... 13 参考文献 .......................................................................................................................................................... 17 全国团体标准信息平台 T/CPMA 009 -2020 II 前 言 本标准按照 GB/T 1.1 —2009给出的规则起草。 本标准由中华预防医学会归口。 本标准起草单位：中国疾病预防控制中心传染病预防控制所、四川省自贡市疾病预防控制中心、四 川大学华西公共卫生学院、四川省自贡市第四人民医院、国家食品安全风险评估中心。 本标准主要起草人：熊衍文、王红、李群、郑翰、裴晓方、许欣、宋自阆、白莉。 全国团体标准信息平台 T/CPMA 009 -2020 III 引 言 艾伯特埃希菌（Escherichia albertii）是近年来发现和命名的埃希菌属中的一个新种，是与人散发肠 道感染及食源性腹泻暴发事件有关的肠道致病菌。艾伯特埃希菌作为新发传染病病原菌，目前尚缺乏区 别于其他肠道致病菌，特别是缺乏区别于大肠埃希菌的特异性生化 表型，且商品化的细菌生化系统和质 谱均不能鉴定艾伯特埃希菌，易造成误检和漏检。 目前国内外尚无艾伯特埃希菌细菌分离、种属鉴定方面的相关标准。本标准在参考国外研究进展的 基础上，经系统性试验优化后提出了艾伯特埃希菌的细菌分离、初步筛选和菌株确证的方法。 全国团体标准信息平台 T/CPMA 009 -2020 1 艾伯特埃希菌分离及鉴定方法 1 范围 本标准规定了艾伯特埃希菌的分离和鉴定方法。 本标准适用于粪便、食品中艾伯特埃希菌的检验。 2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1 艾伯特埃希菌 Escherichia albertii 肠杆菌科埃希菌属中的一个种，革兰阴性杆菌 ，主要生化特征为无动力，吲哚阴性，不发酵乳糖及 木糖，可引起以腹泻为主要临床表现的胃肠道感染。 注：详细资料参见附录A 。 3 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 PCR：聚合酶链式反应 (Polymerase Chain R eaction ) clpX：Clp蛋白酶ATP结合亚单位基因 (ATP -binding subunit of Clp protease gene ) lysP：赖氨酸特异性通透酶基因 (Lysine -specific permease gene) mdh：苹果酸脱氢酶基因 (Malate dehydrogenase) eae：大肠埃希菌粘附抹平效应基因 (Escherichia coli attaching and effacing ) cdtB：细胞致死膨胀毒素 B亚单位基因 (Cytolethal diste nding toxin subunit B ) stx2a：志贺毒素 2a亚型基因 (Shiga toxin subtype 2a ) stx2f：志贺毒素 2f亚型基因 (Shiga toxin subtype 2f ) MLST：多位点序列分型 (Multi -locus sequence typing) EPEC：肠致病性大肠埃希菌 (Enteropathogenic Escherichia coli ) EHEC：肠出血性大肠埃希菌 (Enterohemorrhagic Escherichia coli ) STEC：产志贺毒素大肠埃希菌 (Shiga toxin -producing Escherichia coli) 4 设备和材料 4.1 电子天平：感量 0.1 g和0.01 g。 4.2 恒温培养箱：36 ℃±1 ℃。 4.3 恒温生化培养箱：20 ℃±1 ℃。 全国团体标准信息平台 T/CPMA 009 -2020 2 4.4 光学显微镜：10×~100× 。 4.5 冰箱： 2℃~8℃。 4.6 金属浴：95 ℃~100℃。 4.7 均质器。 4.8 振荡器。 4.9 pH计或精密 pH试纸。 4.10